摘要 目的:了解不同外伤时期内的牙髓组织学改变,为冠折露髓年轻恒牙的活髓保存治疗提供组织学依据。方法:通过组织学和免疫组化法对牙髓组织进行组织学和生长因子(bFGF)分布特征的观察。结果:本组患牙牙髓组织内均未见到局灶性炎症或局灶性坏死现象,即使冠髓出现炎症,而根髓组织基本正常。bFGF染色冠折露髓1周内血管内皮细胞弱阳性,而后染色逐渐增强,且神经纤维也出现阳性。结论;年轻恒牙外伤牙折后牙髓组织的炎症程度并非随着牙髓暴露的时间而加重;bFGF参与了外伤牙髓的修复。 学龄期儿童活泼好动,但自我防护能力较差,常因跌打、碰撞而造成恒前牙的意外创伤,甚至冠折露髓,因儿童恒前牙是萌出不久的牙齿,外伤冠折后极需保存生活牙髓,以利牙根继续发育。本研究目的是通过观察冠折露髓后的牙髓组织学变化,了解外伤后的时期与牙髓组织学改变的关系,以便为临床活髓保存治疗提供组织学依据。同时通过对生长因子(bFGF)分布的观察,求证bFGF与外伤牙髓修复的关系。 表1 冠折露髓时间 |
<1d | <1周 | >1周 | 合计 | |
例数 | 2 | 7 | 5 | 14 |
牙数 | 3 | 9 | 6 | 18 |
bFGF多克隆抗体(博士德公司);ABC试剂盒(美国Santa Cruz公司)。 1.2 方法 常规麻醉下完整取出牙髓组织,于40g/L多聚甲醛中固定(4℃)。常规制作组织学切片,分别进行HE和免疫组化染色,光镜下观察。 免疫组织化学染色采用ABC法。常规制做切片后脱蜡至水,30ml/L 过氧化氢液室温10min灭活内源性酶,0.01mol/L PBS振洗。复合消化液10min,PBS振洗。封闭液10min后,加稀释后的兔抗bFGF多克隆抗体,4℃过夜,PBS振洗。生物素化羊抗兔IgG,室温20min,PBS振洗。DAB显色,苏木素轻度复染。脱水透明封片,显微镜观察。 2 结果 2.1 冠折露髓后不同时期的牙髓组织学变化 冠折露髓不足1d的3个牙,牙髓组织未见明显的血管变化和炎性细胞渗出,接近正常组织相。外伤在1周内的9个牙齿,见牙髓组织内有轻度血管扩张、充血和组织水肿,并有少量淋巴细胞和中性粒细胞浸润(图1)。其中3个牙的牙髓组织内有血管内皮细胞增生,毛细血管数增多,和散在的炎性细胞浸润。而外伤时间在1周以上的牙齿,牙髓组织内的细胞成分增多,有成纤维细胞和神经纤维增生,有较多的淋巴细胞和中性粒细胞浸润(图2)。外伤后6个月的1个牙齿,牙髓组织内血管增生、充血明显,组织水肿,冠髓部分见有较多的炎细胞浸润。而外伤达1年的1颗牙齿,其牙髓组织仅见血管轻度扩张、充血和少量淋巴细胞浸润。本组患牙牙髓组织内均未见到局灶性炎症或局灶性坏死现象,即使冠髓出现炎症现象,而根髓组织基本正常。 图1 外伤1周内牙髓组织轻度炎症反应 (HE,10×10) 图2 外伤1周以上,牙髓组织中度炎症反应(HE,10×40) 2.2 冠折露髓后不同时期的bFGF分布 表2 冠折露髓后不同时期的bFGF分布 |
<1d | <1周 | >1周 | |
血管内皮细胞 | 阴性 | 弱阳性 | 阳性 |
神经纤维 | 阴性 | 弱阳性 | 阳性 |
图3 外伤1周内bFGF染色弱阳性 (ABC,10×10) 图4 外伤1周以上bFGF染色阳性 (ABC,10×10) 3 讨论 |