前 言
正畸治疗常常会引起不同程度的疼痛，很多患者因为怕痛而不敢进行正畸治疗，甚至有些人因此而放弃正在进行的治疗，所以探明正畸性疼痛的发生机制具有重要的临床意义。
目前认为正畸疼痛的发生是由于牙齿移动作为一种伤害性刺激引起牙齿及牙周伤害性感受器兴奋，并由其上位中枢传递到大脑皮层的感觉区引起痛觉，但是对于牙周膜内各种神经纤维在牙齿移动时的变化及其对疼痛发生的作用目前并不清楚；另外对正畸疼痛的传导路径以往主要是通过C-fos的表达来探讨，并已取得一些初步的结果，但是对于作为主要初级传入神经递质的SP在其中的作用目前尚未见报道。
本研究通过免疫组织化学及电镜超微结构观察压力侧牙周膜神经纤维在正畸牙齿移动中的变化，探讨牙周神经在疼痛发生及牙周改建中的作用；通过SP免疫组织化学观察牙齿移动中SP在三叉神经节、Vc以及臂旁核的变化，探讨正畸性疼痛信息可能的传导通路以及SP在其中的作用。
本论文由以下几个部分组成：
实验1 大鼠牙移动牙周膜神经纤维抗SYN免疫组化研究
实验2 大鼠正畸牙移动压力侧牙周膜神经纤维超微结构改变研究
实验3 大鼠正畸牙移动三叉神经节内SP变化的研究
实验4 大鼠正畸牙齿移动中Vc及臂旁核SP变化的研究
实验1 大鼠牙移动牙周膜神经纤维抗SYN免疫组化研究
牙周膜具有丰富的机械感受神经末梢分布，能够提供作用于牙齿上力的强度及方向的信息，同时也分布有伤害性感受神经纤维。正畸治疗常导致患者的不适或疼痛，但是对牙齿移动中牙周神经的变化的研究尚处于初步的阶段。在牙齿移动中，牙周膜压力区是一个过度压缩的区域，Ohtake用镀银法观察到牙周神经存在一个损伤、变性而后增生的过程。另外目前发现有许多神经肽如降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、P物质(substance P,SP)分布于牙周组织中,并且参与了正畸性牙周组织变化的始终，但是对其变化情况各个学者的观点并不一致。Saito[9]观察到牙齿移动一天后CGRP-IR神经数目增加，7天后恢复，而Nakamoto[10]发现牙齿移动6-12小时CGRP-IR及SP-IR神经纤维数量减少，3-7天后恢复，Vandevska[11]证实在加力7天时根尖牙周膜内CGRP-IR及蛋白基因产物（protein gene product9.5）免疫反应神经密度增加，至21天时恢复。以上结果的不同主要是由于实验方法的不同所致。镀银法结果常常不可靠而且是非特异性的[12]，而神经肽免疫组织化学染色法干扰因素较多，本实验采用抗突触素(synaptophysin,SYN)免疫组织化学染色观察压力侧牙周膜神经纤维变化。
材料与方法
1. 主要试剂与仪器
免抗人SYN多克隆抗体 DAKO DENMARK
SABC试剂盒 武汉博士德生物工程有限公司
速眠灵（846液） 长春动物研究所
