［摘要］　目的　对银汞合金充填体表面菌斑中变链菌对汞的转化作用进行实验研究。方法　分别于银汞充填前和充填后1d、1周、2周、4周和8周采取银汞合金上的菌斑，以未作充填的牙上菌斑为对照，进行菌斑成分分析，从中分离、鉴定出变链菌，取纯分菌落接种于10ml TSB培养肉汤中，培养24h，按100ng/ml 加入汞标，再培养24h送检测汞。结果　实验组和对照组的无机汞和有机汞在充填前和充填后各时间点间差异均具有显著性，而充填后各时间点间差异无显著性。实验组和对照组间无机汞和有机汞在银汞合金充填后各时间点上差异无显著性。结论　变链菌能将一定量的无机汞转化为有机汞，银汞合金中汞对这种转化有一定的影响。
［关键词］　变链菌；银汞合金；无机汞；有机汞；转化

　　Lyttle等的研究证实，口腔内有银汞充填体的患者牙菌斑中有汞存在，体外实验表明，变链菌生物膜能促进新充填的银汞合金中汞的释放［1］。在自然界，细菌有代谢性解除汞毒的机制，包括汞的甲基化和去甲基化，以及汞粘附于细菌细胞壁［2］。体外实验已证实，口腔变链菌可使汞甲基化，从而使无机汞转化为有机汞［3］，但有关变链菌在无机汞向有机汞的转化过程中所起的作用知之甚少。本实验就银汞合金表面菌斑中变链菌对汞的转化进行体外研究，报告如下。

1　材料和方法

1.1　实验对象
　　　　本校口腔医学院就读的三、四年级学生，口腔内无银汞充填体、无全身性疾病、近3月无服用抗生素史、有龋但未充填的志愿者16人。
1.2　银汞充填
　　去龋，制备标准洞型，按临床常规操作用银汞合金修复牙体，雕刻，抛光器抛光。
1.3　菌斑采集
　　实验组　在银汞充填前及银汞充填后1d、1周、2周、4周和8周分别采取银汞充填体牙　合面表面菌斑，每位实验者采取1份；对照组取实验者对牙　合同侧或对侧同牙　合相近牙位无银汞充填体牙　合面菌斑作为对照。采样时间为进食后2h。采样时用棉卷隔湿采样牙，生理盐水冲洗，压缩空气干燥，然后使用锐利挖匙刮取牙　合面菌斑。采样过程中注意不要碰到其它部位。所采菌斑样本在无菌条件下转移至含RTF的传送瓶中保存。
1.4　细菌学过程
　　所采菌斑样本经振荡器振荡1min后，用RTF倍数逐级稀释至10-4，用微量移液器取10-2、10-3、10-4菌斑稀释液50μl接种于MSB琼脂平板，一式两份，L棒涂匀，在95%N2、5%CO2条件下37℃培养48h。在MSB上生长、发酵山梨醇及甘露醇被鉴定为变链菌。取大小相似的菌落转种于TSB培养液，在95%N2、5%CO2的条件下37℃培养48h，进行增菌，增菌后增菌液在640nm处的吸光度(OD值)约0.5。
1.5　体外汞转化实验
　　用微量移液器取增菌液100μl接种于10ml的TSB培养液中培养24h后，加入HgCl2标准液，再培养24h，培养条件同前，然后测定TSB培养液中的有机汞和无机汞含量。
1.6　统计方法
　　采用t检验分析、比较银汞合金充填前后实验组和对照组各时间点菌斑变链菌对汞的转化作用。

2　结果

　　变链菌的检出见图1，可以看出对照组的检出率比实验组高。实验组银汞合金充填体表面菌斑中变链菌和对照组无银汞合金充填体牙表面菌斑中变链菌对汞转化实验所测得的无机汞和有机汞浓度平均值（以下简称实验组和对照组银汞充填前后各时间点无机汞和有机汞），发现：两组所测得的无机汞和有机汞均在银汞充填前和充填后1d差别较大，而充填后各时间点差别较小。表1-4所示t检验P值，表明实验组和对照组无机汞和有机汞在充填前和充填后各时间点间差异有显著性，而充填后各时间点间差异无显著性。表5表明实验组和对照组无机汞和有机汞在充填后各时间点上差异无显著性。

表1　实验组各时间点间无机汞t检验p值
Tab.1　The valuation of t-test of inorganic mercury between different times of the tested group

	充填前	充填后
		1d	1周	2周	4周
1d	0.047651
1周	0.002296	0.49638
2周	0.002006	0.453148	0.409951
4周	0.022572	0.487500	0.487047	0.4232
8周	0.013934	0.449113	0.427285	0.3492	0.454789

责任编辑：姚红祥