讨　论

　　本实验结果显示:16d胎龄的鼠胎下颌第一磨牙牙胚在此实验条件下可由帽状期进入钟状期;与基底膜毗邻的间充质细胞分化为成牙本质细胞,并分泌前期牙本质。内釉上皮细胞分化为成釉细胞。此研究表明了利用半固态培养基法体外培养鼠磨牙牙胚可保持其发育过程。
　　在牙胚的发育过程中,中胚层与外胚层的相互作用,首先形成牙板, 经过蕾状期,帽状期,钟状期,硬组织形成期,最后萌出,承担咀嚼功能［2］。 在这一系列的发育过程中,中胚层与外胚层的相互作用,使中胚层的牙乳头细胞分化为成牙本质细胞［3］。 因此体外培养牙胚为研究成牙本质细胞分化及牙胚发育的分子机制提供了非常理想的实验模型。
　　器官培养一般采用三维培养方式, 需将培养的器官放在支架表面以提高氧分压。用于牙胚培养的支架分为两类:一类是Trowell型培养支架,将微孔滤膜放在不锈钢金属网架上,牙胚器官置于滤膜表面,培养液液面以不浸没牙胚为宜,以便牙胚获得较高氧分压［4］;另一类是以含琼脂的半固态培养基作为支架,牙胚置于培养基表面［5］。小鼠磨牙牙胚体积小,氧气和营养成份容易吸收, 不易造成组织内部细胞坏死［6］。本实验采用半固态培养基法培养鼠磨牙牙胚,较好地保持了牙胚形态。
　　牙胚在体外培养时其发育时序与在体内不同［7］。我们研究发现16d的鼠胎下颌第一磨牙牙胚培养5d后,相当于体内胚胎的第18d牙胚;培养9d后, 体外牙胚发育与20d胚胎牙胚发育相似。证实在此条件下, 帽状期牙胚在体外每培养2d,相当于在体内发育1d。
　　牙胚的体外培养已广泛应用于牙胚的发生、形态分化, 细胞分化及牙本质矿化的研究。牙胚体外培养模型的建立具有重要的生物学意义。

［作者简介］朱奇（1971-），男，湖南人，武汉大学口腔医学院在读博士生，研究方向为牙齿发育生物学。
朱奇（武汉大学口腔医学院，湖北　武汉　430079）
樊明文（武汉大学口腔医学院，湖北　武汉　430079）
张旗（武汉大学口腔医学院，湖北　武汉　430079）
边专（武汉大学口腔医学院，湖北　武汉　430079）
陈智（武汉大学口腔医学院，湖北　武汉　430079）

参考文献

［1］　Maas R,Bei M.The genetic control of early tooth development［J］. Crit Rev Oral Biol Med,1997,8∶4-39
［2］　Chen Zhi, Fan Mingwen,Lu Ping, et al. Apoptosis Visualization by in situ TUNEL method［J］. Journal of Comprehensive Stomatology,1998，14∶251-253
［3］　樊明文.口腔生物学［M］.北京:人民卫生出版社,1996，1-3
［4］　Sato E,Kameyama Y,Haeda H, et al. Retardation of mouse odontoblast differentiation by heprin in vitro［J］. Archs oral Biol,1993, 38∶145-150
［5］　Bloch-Zupan A, Mark MP, Weber B, et al. In vitro effects of retinotic acid on mouse incisor development［J］. Archs oral Biol,1994,39∶891-900
［6］　Ahmad N, Ruch JV. Comparison of growth and cell proliferation kinetics during mouse odontogenesis in vivo and in vitro［J］. Cell and Tissue Kinetics,1987,20∶319-329
［7］　Thesleff I,Hurmerinta.Tissue interactions in tooth development［J］. Differentiation,1981,18∶75-88

责任编辑：姚红祥