|
3牙周病与细胞凋亡
牙周炎的相关致病菌及其产物和凋亡：
牙周炎主要与螺旋体，产黑色素普氏菌，牙龈卟啉菌，梭形杆菌，伴放线放线杆菌，具核梭杆菌，嗜二氧化碳嗜血杆菌，微链球菌等细菌感染有关。这些细菌主要通过产生外毒素，酶类，代谢产物，另外细菌自身成分如脂多糖，内毒素等均可导致牙周病的发生发展。细菌及其产物可通过刺激宿主产生各种炎症因子如花生四烯酸的代谢产物，Niederman等认为短链羧酸如乳酸、醋酸、酪酸，在严重牙周病患者龈沟中较轻度牙周炎患者高10倍，而健康人龈沟中不能测到；而且当直接刺激健康人时，其龈沟可产生炎症反应并且释放炎性细胞因子。在细胞水平，短链羧酸能抑制牙龈上皮和内皮的增殖，抑制白细胞的功能和凋亡，不过能刺激白细胞释放细胞因子。在分子水平，这些酸能刺激嗜中性白细胞基因的转录，翻译和蛋白质表达细胞因子如IL1，TNF，CSF等［9］。Ratasirayakorn等又发现多胺可在炎症牙周组织调节信号传导延迟分叶核白细胞的凋亡［10］MmcFarlane等发现牙周炎患者的末梢血单核细胞在受到脂多糖(来源于伴放线放线杆菌或牙龈紫朴啉杆菌)刺激时，能比健康人产生更多的IL1β。Kato［11］等获得伴放线放线杆菌可导致鼠巨噬细胞凋亡的证据，如细胞核形态改变，梯形的DNA碎片。Morimoto［12］等报告伴放线放线杆菌可诱导成骨细胞MG63的凋亡［13］Muro等报道认为伴放线放线杆菌的促进凋亡的能力在牙周炎的始动和发展中很重要。又发现巨噬细胞CD14在伴放线放线杆菌的噬菌作用和感染伴放线放线杆菌的巨噬细胞的凋亡中有作用［14］。
炎症细胞及细胞因子和凋亡：
在牙龈炎症组织中富含巨噬细胞和CD4+T淋巴细胞。Yamamoto等的实验证明，牙龈巨噬细胞的IL4受体的mRNA表达水平较之外周血中的单核细胞或巨噬细胞为高。进而，在体外培养的牙龈巨噬细胞，表现出良好的生长状态；而外周血的单核细胞或巨噬细胞却迅速凋亡；将牙龈巨噬细胞与重组IL4同时孵育，细胞存活率明显下降，牙龈巨噬细胞凋亡率明显升高。该实验提示牙周炎时牙龈巨噬细胞的凋亡减少有助于慢性牙周炎的感染［15］。Yamamoto等进一步研究发现，当淋巴细胞从炎症牙龈组织中分离出来后，经流式细胞仪检测，约20～30%的淋巴细胞是CD4+的T细胞。用RTPCR检测CD4+细胞的IFNγ和IL2(Th1)，IL4，5，6，10，13(Th2)和beta肌动蛋白(housekeeping gene)，发现主要表达Th2细胞因子(如IL6，10，13)有助于在疾病局部高B细胞反应，另一方面缺乏IL4是巨噬细胞在疾病局部堆积的原因［16］。Mogi报道在龈沟液中用酶联免疫检测法检测表皮生长因子，转化生长因子α，IL1β，IL6，干扰素γ，β2微球蛋白和凋亡相关的sFas,bcl2。牙周病患者龈沟液中的TGFα的浓度显著低于对照组，相反，在严重牙周病患者的龈沟液中IL1β，IL6，β2微球蛋白的浓度高于对照组，疾病组的总蛋白量显著高于对照组。TGFα，IL1β，β2微球蛋白浓度与临床测量的牙周袋浓度和炎症出血程度有关。牙周病患者的龈沟液中却测不到凋亡修饰有关的sFas,bcl2［17］。Sawa等报道，牙周炎组织中的淋巴细胞较外周血中的淋巴细胞测到较弱的bcl2和bclxl，本应易感于凋亡；然而，在牙周病损中很少能看到凋亡的淋巴细胞。来自牙周病损的淋巴细胞表达mRNA编码Fas，然而Fasligand mRNA表达很弱，说明这些淋巴细胞易感于Fas介导的凋亡却缺少死亡信号［18］。
Koulouri等对成人牙周炎和早期进展性牙周炎患者的牙周炎病损的肉芽组织切片作了原位杂交和免疫组织化学分析。他们利用Ki67抗原的特异性抗体和组蛋白mRNA的探针检测在切片上正在进行分裂的细胞；28S的rRNA和poly A mRNA的寡核苷酸探针来检测具有合成能力的细胞；利用标记了dUTP的生物素的DNA片段的末端转移酶标记法检测凋亡细胞。发现关于具有合成能力的细胞的比例或在牙周炎组织切片上的分裂细胞的数量上没有区别。然而，他们观察到成人牙周炎的肉芽组织切片较牙龈组织的分裂细胞要多，这些分裂细胞外表上主要是成纤维细胞样细胞。凋亡细胞主要是连接组织细胞，主要是成纤维细胞，很少有分叶核白细胞。在牙龈组织和肉芽组织切片中仅有很少的巨噬细胞可被观察到。他们推测既没有细胞分裂也没有细胞凋亡显著地改变炎症细胞的数量；另一方面，成纤维细胞的凋亡和分裂的存在是牙周组织破坏和重建的正常过程［19］。
责任编辑：姚红祥 |