但也有学者在检测牙周炎患者龈沟液中RANKL、OPG的浓度研究中发现，虽然牙周炎患者RANKL的浓度较正常组要高，OPG的浓度较正常组要低，但是其浓度与牙周炎的严重程度没有表现出明显相关性，RANKL、OPG及RANKL/OPG浓度之比均为轻度>中度>重度。分析其原因可能是随着病变程度的加重，组织中细胞量减少，参与分泌RANKL、OPG的细胞相应减少，因此，分泌到GCF中的量减少而产生该结果。

　　2.2  RANKL/RANK/OPG在体外牙周组织培养中的表达  将牙周组织不同细胞体外培养，发现许多细胞均能表达RANKL/RANK/OPG。人牙龈成纤维细胞(HGFs)为牙龈的主要细胞成分。HGFs经E.coli LPS刺激后，OPG的表达升高，没有检测到有RANKL的表达。LPS与HGFs共培养的上清液能抑制单核细胞向破骨细胞的分化,加入抗OPG的抗体能抑制这作种用［12］。推测在牙周炎的骨破坏过程中HGFs可能起着保护性的作用。多种炎症介质能刺激HGFs产生OPG，HGFs在牙周炎局部免疫反应中可能受细胞因子调控而起保护作用。

    牙周组织很重要的一种细胞是牙周韧带细胞（PDLC），体外培养证明它能够产生RANKL、OPG，且OPG的量大于RANKL。与骨髓细胞共培养，无TRAP(+)MNC形成。只有当同时加入1,25-(OH)2D3/Dex和抗OPG抗体时，能诱导大量的TRAP(+)MNC产生，且这些TRAP(+)MNC具有骨吸收活性。说明PDLC产生的OPG能够抑制自身产生的RANKL，只有当OPG被抗OPG抗体完全中和后，PDLC产生的RANKL才能发挥作用。由于PDLC位于牙槽骨和牙骨质之间，其分泌的OPG可能在抵御炎症组织中RANKL介导的骨吸收中发挥一定的防御功能。PDLC在抗原刺激和细胞因子刺激下产生RANKL、OPG的情况还未见相关报道，其在牙周炎中的作用有待进一步探讨。

    目前有学者发现牙龈卟啉单胞菌的LPS能刺激微血管内皮细胞表达OPGmRNA，但产生的OPG被牙龈卟啉单胞菌分泌的酶所消化，提示微血管内皮细胞也可能在牙周炎中起一定的保护性作用。

    在牙周炎进展中，炎症细胞浸润增加，包括淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞等。体外实验中，将活化的人B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞在M-CSF存在的条件下，与破骨细胞前体共培养，三者均表达高水平的RANKL，其中CD8+T细胞还表达大量的OPG，三者均不表达RANK。此外，CD4+T细胞和B细胞能支持破骨细胞的分化，而CD8+T细胞抑制RANKL诱导的破骨细胞的分化，但是加入抗OPG抗体不能扭转这种抑制作用，提示可能还有其他的抑制因子。因此该作者推测在牙周炎病理发生中B细胞可能起破坏作用，而CD8+T细胞起保护作用。P.g还能在体外刺激单核细胞表达RANK、RANKL以及TNF-α，同时产生大量的TRAP(+)多核细胞，加入OPG能抑制60%~70%的破骨细胞的分化，说明单核细胞分泌的RANKL在细菌引起的骨吸收其主要作用，TNF-α可能也发挥了一定作用。但是，Oda T等实验结果显示P.g外膜蛋白（OMP）刺激PBMCs表达高水平的IL-17，而 RANKL的水平明显低于IL-17，运用流式细胞分析仪检测无CD4+及CD8+T细胞表达RANKL，该文作者推测在P.g感染的牙周炎中浸润的T细胞产生的RANKL可能不起主要作用。但考虑到P.g具有多种毒力因子，不同的毒力因子与T细胞作用产生的免疫应答不同，此实验结果仍不能否认T细胞产生RANKL在牙周炎中的作用。

　　2.3  RANKL/RANK/OPG在动物实验性牙周炎中的表达  Teng YT等用A.a-Hu-PBLCs- NOD/SCID小鼠模拟人牙周炎，发现A.a能够刺激人的CD4+T细胞产生RANKL，引起牙槽骨吸收，静脉注入OPG后，不影响牙周炎症，但能够减少病变区破骨细胞的数量，并抑制骨吸收。抑制其它的细胞因子都不能抑制骨吸收，说明RANKL/RANK在牙周炎牙槽骨破坏中可能起着关键作用。将A.a刺激后的CD4+T细胞在体外用P.g刺激，不产生RANKL，说明T细胞的RANKL的产生具有抗原特异性。而CD8+T细胞和B细胞在牙槽骨吸收中作用很小。此实验有力的证明了抗原特异性T细胞产生的RANKL在细菌引起的牙槽骨吸收中的重要作用。另外，通过将活化的A.a-OMP特异性Th1细胞克隆静脉转移到小鼠体内，用局部抗原刺激构建的实验性牙周炎小鼠模型也证明，活化的T细胞表达高水平的RANKL，牙槽骨明显吸收。抑制T细胞的RANKL的表达，牙槽骨的吸收明显减少，且RANKL/OPG之比降低90%，表明RANKL/OPG之比的升高可能是牙槽骨吸收的关键因素。

责任编辑：唐建华