【Key words】　Antibiotics,tetracycline；　 Peridontitis；　 Collagenases

　　胶原酶（collagenase, COL）能广泛地降解胶原纤维，对牙周结缔组织的破坏起很主要的作用［1］。胶原酶和其他金属蛋白酶是以隐性及活性两种形式存在于牙周炎症组织及龈沟液（gingival crevicular fluid，GCF）中，其活性水平也随着炎症的加重及牙周袋的加深而增加［2，3］。现已证实中性多形核白细胞（polymorphonuclear leukocytes,PMNs）在牙周炎的致病机理中起着很重要的作用，且其在GCF中的数量与GCF中许多酶（胶原酶、弹力酶等）的水平有关［4］。GCF中宿主来源的胶原酶主要来自PMNs、纤维母细胞及巨噬细胞［5］。Sorsa等［6］研究表明，成人牙周炎患者GCF中COL的主要来源是PMNs(PMN-COL)。认为由于在牙周炎症的位点，大量的PMNs迁移至龈沟内致使源于PMNs的COL活性水平随之增加，导致胶原纤维降解、结缔组织破坏［6，7］。有研究表明，牙周炎症位点的GCF-COL水平明显高于牙龈炎及牙龈健康的牙位点［8，9］。盐酸米诺四环素软膏是一种牙周局部缓释药物，主要成分为盐酸米诺四环素(二甲胺四环素)。此药膏遇水变硬形成一层膜，可在牙周袋内缓慢释放其药物成分，并保持局部较高浓度达7 d。众所周知，四环素族药物除抑菌作用外，还有抑制COL的作用。该药对牙周炎治疗的辅助作用已有较多报道［10］，但用药后GCF-COL的活性有无变化尚未见报道。为此，我们对盐酸米诺四环素软膏作为牙周基础治疗的辅助治疗对GCF-COL活性的影响，及其与临床指标的关系做了研究。

　　材料与方法

　　1.病例选择:从北京医科大学口腔医学院牙周科选择成人牙周炎患者31例,男14例，女17例，年龄25～60岁，平均36岁。入选患者符合:①无全身系统性疾病，妇女未妊娠或哺乳；②1年内未接受过牙周治疗；③2周内未服用抗生素或非甾体类抗炎药。④口腔内左右两侧至少各有1颗牙齿的探诊深度(probing depth,PD)≥5 mm且探诊出血(bleeding on probing,BOP)(+)。

　　2.试验设计:采用同一口腔内病情相同牙齿的自身对照设计,受试者按随机表将左右侧共120个受试牙位点配对分组,即用药组和对照组各60个牙位点。首先对入选患者的口腔软组织和牙周状况进行检查，按上述标准选定受试牙。于基线前2周完成全口龈上洁治及口腔卫生宣教。在基线时，先记录受试牙的龈上菌斑指数（plaque index, PLI）,然后用Periopaper收集GCF样本30 s，置于微离心管中，-70℃保存。取样后记录PD、临床附着丧失（attachment loss,AL）和BOP。当天对全部受试牙行龈下刮治。根据随机表确定用药组和对照组。用药组：将盐酸米诺四环素软膏(日本新时代公司提供)注满受试牙牙周袋，1次/周，共放4次。对照组：只对受试牙行龈下刮治，不放任何药物。第4、7及11周复诊检查同基线。

　　3．GCF中COL的测定：采用Nakashima等［11］的方法，测定GCF-COL总量。操作顺序:取出待测样本,每管加入250 μl生理盐水,离心洗提GCF样本,取上清液55 μl再加入1 mmol/L的合成底物(2,4-DNP-Pro-Gln-Gly-Ile-Ala-Gly-Gln-D-Arg;Sigma Chem. Co.) 55 μl，混匀，37°C孵育24 h后再加400μl的1 mol/L盐酸及1.2 ml乙酸乙酯∶丁烷（1∶0.15 v/v）。充分混合20 s，2 500 r/min室温下离心20 min。取上层液在分光光度仪波长365 nm下读数，并转换成酶单位（1U=1 nmol DNP片断/h 释放）,计算COL总量。

　　结果

　　1. 治疗前后各项指标的变化：从表1可见，用药组与对照组各项临床检查指标差异均无显著性（P＞0.05），提示治疗前两组具有可比性。第4、7及11周复查时（表2），两组的各项临床指数与基线比较均有显著改善（P＜ 0.01）。而用药组的改善更更为明显，两组间差异有显著性（P＜ 0.01）。停药后1个月（第7周），用药组各项临床指标继续呈改善状态，且显著低于对照组（除PLI外），P＜ 0.01。在对照组，第11周复查时，各项临床指标与第7周比较均有反弹。

责任编辑：韩晓炜