|
摘 要：目的：为确保临床用药的安全，对中药牙周缓释剂黄甲棒进行毒理学检测。方法：按新药的有关要求作如下实验：①IRC小鼠最大耐受量(MTD)试验。②IRC小鼠致死量(LD50)测定。③Wistar大鼠慢性毒理学试验。④Wistar大鼠口腔粘膜毒性及刺激试验。⑤豚鼠皮肤过敏试验。结果：动物对该药物有很大耐受性，MTD=5.3g/kg体重，ipLD50=(192.7±29.3)mg/kg体重(P=0.95)，对动物15项血液学及其生化指标，13个重要脏器均无明显影响，对皮肤和口腔粘膜无刺激和致敏作用。结论：该制剂临床应用是安全的。
黄甲棒是一种复方中药牙周缓释剂，研究证明［1，2］，该药具有抑制牙周菌斑中细菌、消炎镇痛等作用，在牙周临床上取得了满意疗效。本研究按照新药的有关要求，对该药进行了毒理学研究，为进一步开发应用提供依据。
1 材料和方法
1.1 实验材料
黄甲棒(江西中医学院药学系提供)；
IRC小白鼠，Wistar大鼠和豚鼠(江西医学院实验动物科学部供给)。
1.2 实验方法
1.2.1 急性毒理学研究
最大耐受量(maximal tolerance dose, MTD)试验：将小白鼠60只(雌雄各半)随机平均分为3组，分别给75、150、300g/L黄甲棒混悬剂，按0.7ml/10g体重1次灌胃，观察7d，注意其活动状态。
ipLD50测定：取IRC小白鼠60只，随机分为5组，分别按每公斤体重326、245、184、138、103mg腹腔注射黄甲棒混悬剂，观察7d，记录动物死亡数，计算LD50。
1.2.2 慢性毒理学研究
将Wistar大鼠100只(雌雄各半)平分到5个组中，各组分别按每公斤体重0.2、2、20、200mg黄甲棒和等容量生理盐水灌胃，每天1次，连续35d，每周称体重1次，于末次给药后24h颈动脉取血作血液学和血液生化学检测，断头处死动物，检查脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、结肠、膀胱、睾丸或卵巢、视神经、肾上腺等脏器病理学改变情况。
1.2.3 口腔粘膜毒性及刺激试验
将20只Wistar大鼠下唇缝成一盲袋，然后将其平分为5组，分别用75、150、300g/L黄甲棒及360g/L甲醛、生理盐水0.15ml注入袋内并涂抹其下牙龈粘膜，每天1次，连续6d，每次给药后3h观察其局部改变，最后取粘膜作病理检查。
1.2.4 皮肤过敏试验
20只豚鼠平均分为4组，将其背部脱毛，分别用75、150、300g/L黄甲棒及生理盐水0.2ml涂擦该部，每天1次，共6d，观察局部反应，2周后再用0.05ml新配试药在原涂药部位作皮内注射，观察并记录6、12、24、48、96h皮肤及心率、呼吸、血压情况。
2 结果
2.1 急性毒理学研究
2.1.1 MTD实验观察结果，低、中剂量(75～150g/L)动物全部正常；大剂量(300g/L)组动物活动减少，嗜睡，但无其它异常。3组动物无1死亡，经测试，小鼠对黄甲棒的MTD为5.3g/kg体重。
2.1.2 经综合法求得小鼠ipLD50=(192.7±29.3)mg/kg体重(P=0.95)。
2.2 慢性毒理学研究
2.2.1 慢性毒理学实验表明，4个给药组与对照组比较，其食量较大，体重增加，各种活动未见异常。
2.2.2 血液学及血液生化学检查结果，与对照组比较，15项指标均在正常生理范围内(表1)。
表1 黄甲棒慢性毒性试验血液学和生化指标检测结果
| 组别 |
血液学检测指标 |
血液生化检测指标 |
| Hb(g/L) |
RBC(1012/L) |
WBC(109/L) |
BPL(S) |
CI(μmol/L) |
T-BIL(U) |
ALT(U) |
AST(U) |
TP(g/L) |
ALB(g/L) |
ALP(U) |
GLU(mmol/L) |
Tc(mmol/L) |
BUN(mmol/L) |
Cr(mmol/L) |
| 对照组 |
136.5±10.5 |
7.3±0.9 |
4.4±2.4 |
243.3±35.3 |
45.0±15.4 |
2.0±0.20 |
25.2±8.2 |
455.0±32.0 |
67.3±2.8 |
28.3±3.0 |
61.3±8.5 |
6.46±1.40 |
3.1±0.18 |
17.8±1.1 |
112.9±16.8 |
| 低剂量组 |
137.6±7.6 |
7.8±1.1 |
9.96±2.8 |
234.5±36.3 |
52.2±19.6 |
2.0±0.28 |
22.7±8.3 |
159.9±22.1 |
67.8±2.5 |
31.5±1.4 |
66.3±4.6 |
6.86±0.29 |
3.1±0.10 |
18.1±1.8 |
102.8±10.2 |
| 中剂量组 |
131.8±21.4 |
7.8±1.0 |
8.0±1.4 |
250.2±54.0 |
49.5±26.3 |
2.45±0.30 |
27.8±9.7 |
168.2±16.3 |
66.0±2.9 |
33.2±2.8 |
64.9±4.2 |
6.85±0.21 |
2.96±0.10 |
16.2±1.8 |
87.9±10.1 |
| 高剂量组 |
136.8±14.3 |
8.3±1.0 |
8.7±1.3 |
209.6±54.4 |
61.5±24.8 |
2.31±0.28 |
15.7±9.1 |
168.4±22.3 |
67.3±3.2 |
33.2±3.6 |
65.6±8.3 |
6.9±0.30 |
3.1±0.18 |
16.18±1.9 |
104.6±14.6 |
责任编辑：姚红祥 |