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附图 各分子量的蛋白质在3组中的发生率
SDS-PAGE电泳的某一蛋白质区带的光密度值与该区带面积之积为此区带的丰度(abundance, A)，反映该区带蛋白质的含量。各组中66 000，51 000，26 000，12 000的蛋白质分子的丰度都很大(H组为0.4～0.5， G组和AP组均>0.6)，其中66 000，41 000，26 000，21 000，12 000，10 000的蛋白质分子在H组与AP组，G组与AP组间的丰度差异有显著性(P<0.01)，见表1。 蛋白质的丰度与临床指标的相关分析表明，分子量为82 000，66 000，51 000，41 000，26 000，21 000，12 000的蛋白质丰度与牙周袋探诊深度呈正相关，结果见表1。
表1 各蛋白质丰度及与临床指标的相关性(r)
| 分子量 |
丰度 |
临床指标 |
| 健康组 |
龈炎组 |
牙周炎组 |
PLI |
BI |
PD |
| 82 000 |
0.28±0.10 |
0.32±0.22 |
0.56±0.55 |
0.21 |
0.22 |
0.39*** |
| 77 000 |
0.32±0.25 |
0.18±0.15 |
0.24±0.13 |
| 66 000 |
0.46±0.37 |
0.56±0.31 |
1.02±0.84* |
0.26** |
0.27** |
0.46*** |
| 61 000 |
0.13±0.07 |
0.25±0.09 |
0.32±0.23 |
| 51 000 |
0.32±0.30 |
0.69±0.52 |
0.60±0.66 |
0.13 |
0.17 |
0.32** |
| 41 000 |
0.27±0.12 |
0.31±0.24 |
0.65±0.48* |
0.22 |
0.24 |
0.52*** |
| 26 000 |
0.42±0.68 |
0.54±0.41 |
1.27±1.17 |
0.26*8 |
0.19 |
0.51*** |
| 21 000 |
0.23±0.07 |
0.51±0.30 |
0.88±0.59* |
0.26** |
0.23 |
0.49*** |
| 12 000 |
0.42±0.31 |
1.12±0.86 |
1.87±1.66 |
0.14 |
0.27** |
0.30** |
| 10 000 |
0.20±0.11 |
0.75±0.80 |
1.85±1.80* |
| 注：*健康组与牙周炎组、龈炎组与牙周炎组之间丰度的差异有显著性(P<0.05)； ** 蛋白质丰度与临床指标间的相关性有显著意义(P<0.05)； *** 蛋白质丰度与临床指标间的相关性有高度显著性(P<0.001)；PLI=菌斑指数；BI=出血指数；PD=牙周袋探诊深度
表2示X线片表现为9个“进行性骨吸收”和33个“静止性骨吸收”的牙周炎部位的龈沟液蛋白质的丰度和发生率，分析结果表明“进行性骨吸收”部位的82 000，66 000，51 000，41 000，26 000，12 000蛋白质分子的丰度显著高于“静止性骨吸收”部位(P<0.05)。分子量为82 000，31 000，21 000，15 000，12 000的蛋白质的发生率在“进行性骨吸收”部位显著升高。
表2 “进行性骨吸收”和“静止性骨吸收”部位
各蛋白质的丰度和发生率 |
| 分子量 |
“进行性骨吸收” |
“静止性骨吸收” |
| 发生率 |
丰度( ±s) |
发生率 |
丰度(±s) |
| 82 000 |
100.00** |
0.90±0.65* |
30.30 |
0.25±0.10 |
| 66 000 |
100.00 |
1.97±1.03* |
96.97 |
0.75±0.54 |
| 51 000 |
77.78 |
1.49±0.89* |
87.88 |
0.38±0.35 |
| 41 000 |
100.00 |
1.05±0.39* |
60.61 |
0.47±0.41 |
| 31 000 |
55.56** |
0.59±0.36 |
9.09 |
0.13±0.15 |
| 26 000 |
100.00 |
2.18±1.42* |
87.88 |
0.99±0.95 |
| 21 000 |
100.00* |
1.00±0.52 |
63.64 |
0.83±0.63 |
| 15 000 |
0* |
|
42.42 |
1.91±0.95 |
| 12 000 |
100.00* |
3.48±1.80* |
54.55 |
1.06±0.75 |
注：* “进行性骨吸收”和“静止性骨吸收”部位的蛋白质丰度和发生率的差异有显著性(P<0.05)； **差异有高度显著性(P<0.001)
讨论
本研究结果表明龈炎、牙周炎龈沟液的蛋白质区带数显著多于健康龈的蛋白质区带数，说明炎症时龈沟液的蛋白质成分更复杂。比较分析同一个体的龈沟液蛋白质和血清蛋白质，见龈沟液的部分蛋白质区带与血清一致，而部分区带则为非血清源蛋白质。
一、龈沟液中的非血清源蛋白质
本研究发现在炎症情况下蛋白质成分明显增多，出现了一些健康龈龈沟液样本中未见到的蛋白质分子。如分子量为31 000和33 000的蛋白质只在龈炎、牙周炎组出现，18 000蛋白质仅出现于龈炎组，分子量为7 000，15 000，63 000的蛋白质只在牙周炎组出现。此外龈炎、牙周炎组出现了高分子量蛋白质，如94 000，100 000，113 000，115 000蛋白质。41 000和21 000蛋白质分子多见于龈炎、牙周炎，发生率为70%，而在健康龈沟液较少见，发生率为35%～45%。此外牙周炎组41 000和21 000蛋白质分子的含量显著多于龈炎和健康组，在“进行性骨吸收”部位41 000 蛋白质含量显著升高。这些蛋白质的含量与临床指数密切相关，随牙周袋深度增加41 000蛋白质的含量明显增高(P<0.001)。21 000蛋白质的含量与菌斑指数亦呈显著正相关(P<0.05)。由此可见21 000和41 000蛋白质与牙周组织的破坏相关，应对其本质进行深入研究。Makela等［3］的研究表明12 000的低分子量蛋白质是重度牙周炎龈沟液中的主要蛋白质，其含量与蛋白质总量和中性多形核白细胞的溶蛋白活动相关。本研究证实12 000 蛋白质分子是健康龈和炎症龈共有的蛋白质成分，在3组中的发生率均较高。但是在炎症情况下12 000蛋白质的含量显著升高(G、AP丰度>1, H丰度为0.42)，在“进行性骨吸收”部位此蛋白的含量显著高于“静止性骨吸收”部位。该蛋白的含量还与出血指数、牙周袋深度等临床指数呈正相关。
责任编辑：姚红祥 |