牙周炎免疫防治研究进展

作者:朱江 综述 谢昊 樊明文 审校  文章来源:口腔医学纵横 

2008-4-4 18:07:50         【博客】 【论坛】 【投稿】 【打印】 【关闭


  (3) 其他  荚膜多糖为牙龈卟啉菌的弱抗原,纯化的多糖本身并不能诱导血清抗体反应。Schitterle[11]用多糖与蛋白质的共轭物免疫小鼠,免疫一周后,在鼠皮下接种牙龈卟啉菌, 结果免疫鼠较对照组更健康,体重变化较少,且继发感染部位的溃疡面积较小。但多糖 蛋白共轭物仅能诱使鼠1gM升高, 而非1gG,提示观察到的保护性免疫反应可能是T细胞介 导的免疫反应的结果。
  Holt[12]等用牙龈卟啉菌的胞膜、胞壁联合免疫猴使猴血清特异性抗体滴度显著升 高,并减轻了牙龈卟啉菌在龈下的定居。Okuda[3]等提取牙龈卟啉菌的血凝素蛋白 ,用其免疫仓鼠,使其产生了保护性免疫反应,减轻了牙龈卟啉菌对牙周组织的破坏。
  3. 多肽疫苗 多肽疫苗是用人工合成肽抗原配以适当载体与佐剂制成的合成疫苗。Lee[13]等克 隆牙龈卟 啉菌的菌毛基因fimA,然后合成一系列由10~20个氨基酸组成的多肽。实验发现,来自菌毛 基因羟基端1/3的肽序列能显著减少卟啉菌粘附至羟基磷灰石。Ogama对牙龈卟啉菌菌毛的亚 单位蛋白菌毛素的多肽序列进行分析,发现337个氨基酸组成的序列中有6个免疫优势的片段 ,分别合成三个含有免疫优势片段的多肽-FP381(42-161)、FP381(202-221)、FP381(2 16-243),将这些合成肽与不完全弗氏佐剂一起免疫豚鼠,结果FP381(202-221)诱导产生 的保护性免疫反应最强烈,甚至较天然菌毛蛋白更甚。
  4. 基因工程重组疫苗  研究基因工程重组疫苗,首先将选定的免疫性抗原或抗原决定簇的基因片段引入细菌、酵母 或能连续转化的哺乳动物细胞的基因中,然后以基因工程技术生产大量抗原,从而制备只含 有免疫性抗原的纯化疫苗。
  Dusek[14]将牙龈卟啉菌的血凝素基因HagB克隆进质粒载体,并将携带Hagh的质粒 载体转入无致病力的鼠沙门氏杆菌中表达,其表达产物为50KD的重组蛋白。实验证明,此重 组蛋白为血凝素的竞争性抑制剂,可减轻牙龈卟啉菌的血细胞凝集作用。分离、纯化该蛋白 质,并用其免疫豚鼠,免疫后豚鼠血清抗体显著升高。
  Washington[15]将编码菌毛素的基因片段克隆进VecterpET116,然后将该载体转入 大肠杆菌BL21表达,表达产物为42KD的蛋白质。命名为r-菌毛素,此r-菌毛素可与兔抗菌毛 素抗体发生反应,以r-菌毛素免疫鼠,可诱导细胞免疫发生。
  Kawamoto将编码外膜蛋白的基因MD125克隆在大肠杆菌中表达,表达产物为40KD的重组外膜 蛋白(rOMP),将纯化的rOMP免疫小鼠,可使鼠的血清抗体滴度升高。而进一步研究发现抗 rOMP的特异性抗体IgG通过补体介导途径杀死牙龈卟啉菌。这表明rOMP为预防牙龈卟啉菌感 染致牙周炎的一种候选疫苗。
  二、被动免疫
  由于高纯度疫苗提纯构建十分因难,有少数学者转向进行被动免疫预防牙周炎的研究,期望 通过单克隆抗体或多克隆抗体的被动传导,以达到预防和控制牙周炎发生的目的。
  1. 单克隆抗体  单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)因具有性质纯、效价高、特异性强、少或无血清 反应等特点,而被广泛应用于医学生物学各领域。
  Booth[16]等制作了7个抗牙龈卟啉菌的鼠的McAb,从中筛选出能识别所有牙龈卟啉 菌菌株的McAb 61BG1.3为最佳McAb,将其肌肉注射入牙周炎病人体内,跟踪观察发现9个月 内,病人龈下无牙龈卟啉菌粘附,且病人血清中无抗鼠McAb 61BG 1.3的特异性抗体产生 。McAb 61BG1.3具有良好的细胞表面着色特性,能识别牙龈卟啉菌的血凝素蛋白,而血凝素 蛋白是介导牙龈卟啉菌粘附,并给其输送营养物质的重要因子,故McAb 61BG 1.3通过 识别并与之结合,从而阻断了牙龈卟啉菌的粘附和生长。这种阻断效果持续了9个月。
  2. 多克隆抗体  多克隆抗体是通过给动物接种免疫原所获得的含有多种抗体的免疫血清。若将获得的多种抗 体被动传导至口腔,则可通过抗体减轻牙周炎病原菌的粘附和生长,从而实现其预防牙周炎 的效果。

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责任编辑:姚红祥  

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