经x2检验，P＜0.05。 　　2.图像分析结果 　　涂DMBA不同周数组间血管密度及血管面积密度（表2）。 表2　涂DBMA不同周数组间血管密度（个／mm2） 　　　和血管面积密度值（％）

涂DMBA周数	例数
		血管密度	血管面积密度
第4周 第5周 第6周 第7周 第8周 第9周	5 5 5 5 5 5	7.44±2.22 7.33±2.12 9.09±6.10 11.07±4.45 10.83±3.74 11.47±3.75	1.72±1.07 1.04±0.93 1.59±0.47 2.47±1.00 1.60±0.65 1.91±0.62

表2示：涂药第4～5周血管密度值无明显变化，第5～7周明显上升，7～8周保持稳定，8～9周又逐渐上升。血管面积密度值涂药第5～7周和第8～9周持续上升，第4～5周和第7～8周下降。 　　从表3可见，正常颊囊粘膜与鳞癌组间血管密度值有高度显著性差别（P＜0.01）；轻、中、重度异常增生组较正常颊囊粘膜组，鳞癌组较炎症组血管密度值增高有显著差别（P＜0.05）；其余各组间血管密度值无显著性差别（P＞0.05）。 表3　不同病理变化组间动物颊囊粘膜下 　　　血管密度值（个／mm2）

病理分级	例数		α=0.05	α=0.01
正常粘膜 炎　　症 轻度异常增生 中度异常增生 重度异常增生 癌	6 4 9 8 7 2	3.39±1.96 6.42±3.07 8.89±4.92 9.46±3.17 9.95±4.33 13.83±4.33	A AB BC BC BC C	A AB AB AB AB B

采用单因素方差分析，Duncan法作组间两两比较，字母相同为无显著差异。 　　从表4可见，正常颊囊粘膜与重度异常增生、鳞癌组间，炎症与重度异常增生、鳞癌组间粘膜下血管面积密度有高度显著性差别（P＜0.01）；轻、中度异常增生组较正常粘膜组，中度异常增生组较炎症组粘膜下血管面积密度有显著性差别（P＜0.05）；其余各组间粘膜下血管面积密度无显著性差别（P＞0.05）。 表4　不同病理分级组间动物颊囊粘膜下 　　　血管面积密度值（％）

病理分级	例数		α=0.05	α=0.05
正常粘膜 炎　　症 轻度异常增生 中度异常增生 重度异常增生 癌	6 4 9 8 7 2	0.46±0.27 0.70±0.28 1.45±0.73 1.64±0.66 2.25±0.88 2.30±0.11	A AB BC C C C	A A AB AB B B

　采用单因素方差分析，Duncan法作组间两两比较，字母相同无显著差别。

图1　正常粘膜的明胶墨汁血管灌注

图2　异常增生粘膜的明胶墨汁血管灌注

讨　论
　　1.动物模型连续病变谱动态分析
　　1954年Salley首次利用DMBA诱导叙利亚品系金地鼠颊囊，成功建立了口腔鳞癌的实验动物模型〔1〕。该模型目前被认为是研究由癌前病变向癌演变动态过程的经典模型〔2、3〕。本实验亦采用此模型，其肉眼观察病变序列如下：“正常粘膜→粗糙、充血、糜烂→白斑→癌”，经病理证实，动态变化序列与以往报导相符，即“正常粘膜→炎症→单纯增生→不典型增生（轻度→中度→重度）→原位癌”。树脂血管铸型双目解剖镜下的观察初步发现，血管生成过程基本与地鼠颊囊粘膜病变过程同步，也存在“稀疏、平滑而又均匀的毛细血管网→扩张、扭曲、新生血管增多→血管空间构筑紊乱”的癌血管独特动态变化规律。另外，比较颊囊癌变的肉眼观察和病理检测结果发现，光镜下所见的癌变时间序列较肉眼观察约提前1→2周，证实病理检测是一种更可靠的病变诊断方法。提示临床医师在重视肉眼观察的同时，不能忽略病理诊断。
　　2.癌前病变期血管生成的动态观察
　　血管生成，通常在生理和病理条件下发生，多见于伤口愈合，行经、胚胎发育、糖尿病性视网膜病、风湿性动脉炎、休克和肿瘤生长〔4〕。生长的持续性、无限制性，是肿瘤血管生成有别于其他状态下血管生成的二大特点。目前，对于肿瘤血管的定量研究尚无成熟的方法。有研究发现，血管密度是衡量肿瘤血生成的较好指标，对于肿瘤的生长、转移和预后具有一定指导意义〔5、6、7〕。
　　本实验采用简便、易被识别的明胶墨汁灌注技术，检测血管密度值和面积密度值，动态观察颊囊粘膜癌变过程中血管生成情况，结果显示：涂DMBA第5～7周和第8～9周，血管密度和面积密度值持续升高，该时间经肉眼和光镜观察分别属于正常→异常增生，以及异常增生→癌的转变期，提示旺盛的血管生成活性。扩张及新生的毛细血管，可能给局部组织带来丰富的营养物质，从而促进细胞的恶性转换；而涂DMBA第4～5周和7～8周显示出血管生成处于相对稳定期，可能是癌变过程的量变期，尤其是第4～5周属于上皮异常增生早期。提示在这一时期给予干扰，则可能较好地阻断癌变发展。

责任编辑：姚红祥