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摘 要:为探讨口腔粘膜下纤维性变(OSF)中胶原增生的机制,透射电镜下对成纤维细胞分类计数,结果表明合成胶原功能最旺盛的成胶原细胞在病变早期、中期增多,降解胶原能力最强的破纤维细胞在病变中期、晚期减少,其差异均有显著性。提示OSF中胶原纤维的堆积在早期主要为合成的增多,中期既有合成的增多,也有降解的减少,而晚期则主要为胶原降解不足所致。 关键词:口腔粘膜下纤维性变 成纤维细胞 超微结构
口腔粘膜下纤维性变(oral submucous fibrosis,OSF)是一种慢性疾病,并成为癌前状态〔1〕。对于OSF中与胶原代谢密切相关的细胞--成纤维细胞(fibroblast,Fb)的研究,目前多集中于体外细胞培养法〔2,3〕,而对病变组织中Fb的原位研究尚较缺乏。本文通过研究OSF中Fb的超微结构,探讨OSF的发病机制。
材料和方法
1.病变组来源于湖南医科大学口腔系粘膜病专科门诊所收集的OSF病人颊部病变组织标本,对照组5例取自无槟榔、烟、酒嗜好,身体健康的志愿者相应部位颊粘膜。标本切下后均一分为二,一份用10%中性福尔马林固定,用于光镜检查,另一份用2.5%戊二醛固定,用于电镜观察。 2.经福尔马标固定的标本按常规石蜡包埋切片,厚4μm,进行HE染色显示一般结构,请病理学专家确诊,并将病变组织按病理学标准〔1〕进行分期。 3.从已确诊的OSF病变标本中选择早、中、晚期各5例,加上正常对照5例共20例标本,将其相应的经戊二醛预固定的标本按常规透射电镜制样,每个标本制两个铜网,HITACHI-H-600(日本)透射电镜观察。 4.Fb分类计数:按张树欣等〔4〕的区分标准,电镜下对OSF每期及正常对照分别随机计100个Fb中成胶原细胞及破纤维细胞的细胞数。
结 果
1.OSF各期均可见到广泛分布的Fb,其胞浆内富含粗面内质网(rough endoplasmic reticula,RER)、线粒体(mito chondria,Mi)。 RER池明显扩张,部分呈大泡状,外有膜包裹,膜上有颗粒状核糖体,池内有絮状物。Mi则呈空泡性变,体积增大,密度降低,嵴状结构紊乱或消失,但双层膜仍清晰可见。大部分Fb中溶酶体少见,未见到具周期性横纹的胶原原纤维被Fb吞噬的现象。早期和中期的病变组织内可见呈片状增生的Fb,三五成群,紧密相邻,甚至排列成行,似上皮细胞。晚期Fb 量则明显减少。 在OSF中、晚期胶原纤维束间可见片状高密度区域,其电子密度似胞浆,内有残余的细胞器膜结构,无细胞核、细胞膜,周围有无周期性横纹的胶原纤维(图1)。
 图1 胶原纤维(f)间的片状高密度区,内有残余的细胞器膜结构(m)。×10000
2.Fb分类计数 OSF各期均可见到处于不同发育阶段的Fb,包括少分化成纤维细胞、幼成纤维细胞、成胶原细胞、肌成纤维细胞、破纤维细胞及纤维细胞六种类型。成胶原细胞呈梭形,细胞边缘有微绒毛,核呈卵圆形或杆状,胞浆内RER发达,且RER池明显扩张(图2)。破纤维细胞呈梭形,表面突起较多,核较小,常偏于一侧,胞浆内含大量各级溶酶体和吞噬泡,RER不发达(图3)。计数结果显示,成胶原细胞在OSF早期、中期增多,晚期较前两期减少,而与正常无差别;破纤维细胞在OSF中期、晚期较正常及早期减少,其余各期无差别。(表1、2)。
表1 两种Fb的计数
| Fb |
正常(%) |
OSF(%) |
| 早期 |
中期 |
晚期 |
| 成胶原细胞 |
17 |
32 |
29 |
17 |
| 破纤维细胞 |
18 |
10 |
2 |
0 |
|
Fb |
早期 与正常 |
中期 与正常 |
晚期 与正常 |
早期 与中期 |
早期 与晚期 |
中期 与晚期 |
| 成胶原细胞 |
<0.005 |
<0.05 |
>0.05 |
>0.05 |
<0.005 |
<0.05 |
| 破纤维细胞 |
>0.05 |
<0.005 |
<0.005 |
<0.005 |
<0.005 |
>0.05 |

图2 成胶原细胞,示增生、扩张的RER(R)。×15000
责任编辑:姚红祥 |