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本实验采用两种染色方法对电泳后的凝胶进行处理,发现CBB R-250染色,10%乙酸脱色,可以清晰地显现紫红色的富脯蛋白区带,而脱色液中含有甲醇的方法只显出蓝色区带。本实验进一步证实了Beeley等的观点。富脯蛋白的这种变色效应与CBB R-250和富脯蛋白的特殊结构有关[6]。 本实验结果表明不同个体之间唾液蛋白存在明显差异。牙周病患者与正常个体腮腺唾液蛋白Tricine-SDS-PAGE电泳图谱的差别是由疾病所致还是个体差异的缘故,有待进一步研究。 本实验采用的Tricine-SDS-PAGE方法分析腮腺唾液蛋白,操作简便,不必对唾液样品进行脱盐、浓缩等处理,可直接加样,样品用量少,分辨率高,尤其适合于小分子量蛋白的分离。此方法还可以应用于全唾液及颌下腺-舌下腺唾液蛋白的分离纯化。
作者单位:郭 颖 罗海燕 杨美薷 华西医科大学口腔医学院 610041 黄 宁 吴 琦 王伯瑶 华西医科大学感染与免疫研究室
参考文献
1 Mandel ID. The diagnostic uses of saliva. J Oral Pathol Med,1990,19(3):119~125 2 杨萍综述.唾液蛋白质的研究进展.国外医学口腔医学分册,1993,20(2):78~82 3 Schgger H, Jagow G. Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa. Anal Biochem,1987,166:368~379 4 Beeley JA. Clinical applications of electrophoresis of human salivary proteins. J Chromatogr, 1991,569:261~280 5 李成文主编.现代免疫化学技术.北京:军事医学科学院微生物流行病研究所出版社,1990:6 6 Beeley JA, Sweeney D, Lindsay JC, et al. Sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis of human parotid salivary proteins. Electrophoresis, 1991,12:1032~1041
责任编辑:姚红祥 |