羟基磷灰石复合盖髓剂的体外抑菌实验

作者:黄华 彭彬 陈智 边专  文章来源:口腔医学纵横 

2007-4-5 15:51:12         【博客】 【论坛】 【投稿】 【打印】 【关闭

  抑菌或杀菌作用是盖髓剂应具备的性能之一,本实验通过体外抑菌实验,以氢氧化钙和羟基磷灰石作对照,观察羟基磷灰石复合盖髓剂的抑菌性能。

材料和方法

  一、材料
  羟基磷灰石生理盐水糊剂(Hydroxyapatite,简称HA);
  氢氧化钙生理盐水糊剂(Calcium Hydroxide,简称CH);
  羟基磷灰石复合盖髓剂生理盐水糊剂:由羟基磷灰石、甲硝唑、红霉素、奥丙嗪组成(简称HMEO);
  二、菌种及培养基
  大肠杆菌(Escherichia Coli, Ec,湖北医科大学微生物教研室提供),LB培养基
  变形链球菌(Ingbritt),BHI培养基
  产黑色素普氏菌(Prevotella melaninogenicus)ATCC 25845,BHI冻融血培养基
  三、方法
  将各实验菌种按其所需条件分别接种于含相应培养基的试管内,培养24h。分别称取0.1g的羟基磷灰石和氢氧化钙粉剂,另称羟基磷灰石0.1g,甲硝唑、红霉素和奥丙嗪各50ug,与适量生理盐水调成糊状。
  取灭菌的直径为90mm培养皿12个,按菌种等分为三组,即每组4个培养皿。取适量标准化的菌液均匀涂布于相应的培养基表面,约干燥后,用内径约5mm的玻璃管于每一培养皿打3个孔,将上述材料置入洞内。对照材料为生理盐水,采用纸片法,将经高压灭菌的浸渍有生理盐水的小圆纸片(直径5mm)贴附于培养皿上。
  需氧菌37℃孵育24h,厌氧菌37℃孵育48h。观察抑菌情况,用直尺测量各抑菌圈直径。本实验重复做三次,数据最后进行方差分析。

结 果

  实验结果见附表,统计学分析表明:三种材料之间的抑菌作用具有显著性差异,HMEO对三种实验菌种具有较强的抑菌作用,CH其次,HA对三种实验菌种无抑菌作用;另外,HMEO对三种实验菌种抑菌作用具有显著性差异,其中对变形链球菌的抑菌种作用最强,具有统计学意义;CH对三种实验菌种抑菌作用的差异不具有统计学意义。

    附表 三种材料的抑菌作用(mm,)

  大肠杆菌 变形链球菌 产黑色素普氏菌
HA 5.56±0.73 5.67±0.87 5.56±0.88
CH 11.22±0.67 12.00±1.00 12.11±1.05
HMEO 21.22±2.33 41.33±2.35 34.44±2.88
生理盐水 5.00±0.00 5.00±0.00 5.00±0.00

讨 论

。  理想的盖髓剂除应具有良好的促进牙髓组织修复再生的能力外,还应具有较强的抑菌作用或杀菌作用和消炎作用。然而没有一种单一的盖髓剂能满足上述要求,因此,人们对复合盖髓剂进行了广泛的探索。抗生素对牙髓无刺激,无毒性,可以抑菌,促使牙髓消炎愈合。皮质激素具有较强的抗炎作用,可降低毛细血管的通透性,减轻水肿和渗出,从而缓解疼痛和消除炎症。单独应用皮质激素导致感染扩散,故多与抗生素合用。牙髓内感染为混合感染,常采用多种抗生素。然而Everret[1]和Harris[2]发现抗生素复合皮质激素盖髓无牙本质桥形成;Taylar[3]等证明Ledermix(一种含醋酸去炎松和四环素的成品盖髓剂)对细胞有明显毒性作用;Yoshiba[4]实验提示,抗生素尤其是米诺霉素加入磷酸三钙可延迟牙本质桥的形成。鉴于上述研究结果,我们于羟基磷灰石中加入甲硝唑、红霉素和奥丙嗪(为一种非类固醇类抗炎药物)。
  本实验选择大肠杆菌、变形链球菌和产黑色素普氏菌作为实验菌种,大肠杆菌是常见的革兰氏阴性菌,变形链球菌经动物实验证实是最有效的致龋性微生物[5],产黑色素普氏菌是感染根管内的优势菌。结果表明HMEO对三种实验菌种具有较强的抑菌作用,其中对变形链球菌抑制作用最强,这可能与复合盖髓剂中的甲硝唑和红霉素协同作用有关。甲硝唑于1978年被WHO确定为抗厌氧感染的首选药物[6],局部或全身用药均无特殊副作用;厌氧菌是龋坏性牙本质或牙菌斑中的优势菌属,Hoshino[7,8]等人证实甲硝唑可有效灭活龋坏性牙本质中的细菌;红霉素属大环内酯类抗菌素,具有广泛抗菌谱,对革兰阳性菌具有较强的抑制作用,临床上与甲硝唑配合使用效果肯定。

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责任编辑:姚红祥  

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