图8　单抗ZS2/286+S.mutans Ingbritt C

图9　单抗ZS2/286+S.rattus BHT

图10　S.sobrinus 6715阴性对照

讨　论
　　茸毛链球菌（血清型d,g型）因其较强的产酸性、耐酸性及致龋潜力，是除c型变形链球菌外受以关注的另一重要致龋菌。主要表面蛋白抗原SAI/II，又称P1,AgB,PAc,PAg等在除血清b型即鼠链球菌（S.rattus）外的变形链球菌组中广泛分布，动物实验证实，SAI/II有较强的免疫原性，能有效地减少实验性龋齿的发生。
　　鉴于鼠链球菌细胞壁表面无SAI/II存在［3,4］，本研究选择其为参考菌株。首先，用抗6715全细胞多抗分别与茸毛链球菌6715、变形链球菌Ingbritt C和鼠链球菌BHT三菌株作用，均显示不同程度的反应，表明三菌株之间存在有交叉反应性抗原。尽管多数研究显示鼠链球菌细胞壁表面不存在SAI/II，但其葡糖基转移酶和抗原A等与变形链球菌的相关抗原仍存在交叉反应性［5］。用抗PAg的多抗与三菌株作用显示，其与茸毛链球6715明显反应，与变形链球菌IngbrittC也有较明显反应(图4, 5)，证实了变形链球菌主要表面蛋白PAc与PAg具有交叉反应性，即两者具有共同的抗原决定簇。有研究表明，茸毛链球菌主要表面蛋白PAg与变形链球菌主要表面蛋白抗原PAc在分子量大小和氨基酸组成等方面十分类似，具有共同的抗原决定簇，在与相关抗体作用时表现为交叉反应性。Berzofsdy等［6］从分子水平将抗原的交叉反应性分为两大类：第一类是指抗原上的两个配体（即决定簇）均可与同一分子抗体的同一抗原结合部位结合，然而亲和力有所不同；另一类交叉反应性指的是抗原决定簇分别与抗体中的不同抗体分子起反应而表现出的交叉反应性，这一类交叉反应性多见于抗体为不均一的条件下，即见于多抗。目前有研究推测，氨基酸序列AKA-YEA和YEA-L-QY可能是PAc与PAg的发生交叉反应的决定簇［7］。本实验未发现抗PAg多抗与鼠链球菌BHT发生反应（图6），这与多数学者的报告一致［3,4］。
　　单抗是针对单一抗原决定簇的具有高度特异性的均质抗体，可克服常规抗血清即多抗的非特异性交叉反应，但单抗的特异性并不能排除由于识别类似抗原或不同抗原上相同决定簇所造成的交叉反应［8］。本研究用所制备的单抗ZS2/286与三菌株作用显示，其可与茸毛链球菌6715发生反应（图7），与变形链球菌Ingbritt C反应不明确（图8），推测存在所制备的单抗可识别PAc上的PAg的共同或类似的抗原决定簇的可能性。但与抗PAg多抗相比，单抗作用于细菌上的金标颗粒明显不及多抗，这可能与单抗的识别单一抗原决定簇的特性有关。抗PAg的单抗仍与鼠链球菌BHT无反应(图9)，进一步证实了由多抗作用所获结论。
　　关于主要表面蛋白抗原在变形链球菌组细菌上的分布位置，研究显示各血清型的分布具有特征性。本实验显示，无论是用抗PAg的单抗还是多抗，胶体金颗粒均分布于细菌表面，这一结果证实了主要表面蛋白是细菌细胞壁的组成成份，均匀分布于整个细胞壁表面。所不同的是，在变形链球菌胶体金颗粒呈单层分布，而在茸毛链球菌，胶体金颗粒呈多层分布，并显示标记的金颗粒与细菌细胞表面的茸毛层(fuzzy coat layer)联系紧密，提示了茸毛层与表面蛋白抗原的相关性，即这种抗原可能是细菌表面茸毛层的组成部分。
 

作者单位：武汉市(430079)湖北医科大学口腔医学院
参考文献

1　Moisset A, Schatz N, Lepoivre Y, et al. Conservation of salivary glycoprotein-interacting and human immunoglobulin G-cross-reactive domains of antigen I/II in oral streptococci. Infect Immun, 1994, 62:184～193
2　Loeshe WJ. Role of Streptococcus mutans in human dental decay. Microbiol Rev. 1986; 50:353～380
3　樊明文，边专，杜民权等. 抗原I/II在变形链球菌组细胞表面分布的观察. 中华口腔医学杂志，1996；31（6）：323～325

责任编辑：姚红祥