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〔摘要〕 目的:验证牙菌斑中超氧化物阴离子自由基与菌斑氧化还原电位的关系。方法:①测试菌斑氧化还原电位。②利用SOD作为干扰因素观察氧化还原电位的变化。结果:菌斑电位低于非菌斑牙面电位,为负电位。菌斑加SOD后使菌斑电位升高。结论:菌斑负电位与超氧化物阴离子自由基有关,自由基可能是菌斑负电位形成的主要因素。 关键词 牙菌斑;氧化-还原电位;龋齿;超氧化物;阴离子;自由基;超氧化物歧化酶
有实验结果证实,龋洞内存在的超氧化物阴离子自由基与菌斑牙面电位(Eh)密切相关,且菌斑内亦含有高浓度超氧化物阴离子自由基〔1〕。有关菌斑形成过程中伴随氧化还原电位的变化,国内外文献已有报道〔2~5〕。氧化还原反应必然涉及到氧化还原电位Eh的变化。为了进一步研究菌斑、Eh、超氧化物阴离子自由基与龋病的关系,本实验对菌斑牙面的生物电位进行测量。并利用超氧化物歧化酶(SOD)作为干扰困素,观察菌斑内超氧化物阴离子自由基与Eh变化之间的关系。
1 材料和方法 1.1 测试对象 为本院门诊就诊患者,共83例。患者年龄15~57岁,男女比例1∶1.2。分为两组:第一组测试菌斑牙面的氧化还原电位;第二组测试超氧化物阴离子自由基对电位的影响。 1.2 测试仪器和试剂 牙齿表面电位测试仪〔1〕系第四军医大学与西安电子科技大学联合研制,性能:分辩率±0.1 mV,误差率<1%,加有滤波装置,使20 Hz以上电波不致干扰测量,装有单片机程序控制,微型打印机自动记录,记录间隔1次/3 s。带两个同质铂铑合金丝做成的、大小形状一致如口腔探针的电极。一个为探测电极,另一个为参考电极。牛血SOD:甘肃省夏河生物制剂厂。 1.3 测试方法〔6〕 第一组:选取经洁治确无菌斑的健康牙唇颊侧光滑牙面53例,嘱患者正常饮食,但不刷牙,菌斑自然生长,7 d后测试。测量前对患者不进行任何口腔处理,如消毒、隔离口水及含漱等。将参考电极接触非菌斑牙面(牙尖或切嵴),探测电极接触菌斑牙面,对两者之间电位进行测试。测试仪便记录出菌斑牙面与非菌斑牙面之间的电位,记录20个以上数据。取10个稳定连续数据的均数作为测试结果,为实验组。之后在探测电极接触点处将菌斑刮去,使之成为非菌斑牙面,再测试两点间电位,为对照组。测试之后对牙面其余部分残余菌斑进行菌斑染色检查,确为菌斑者,实验结果有效,否则为无效。 第二组:测试前病例处理和测试方法基本同第一组,共30例。不同的是先测量菌斑牙面与非菌斑牙面之间的电位差,为对照组值。之后,不间断测量,分别于菌斑上滴0.05 ml生理盐水及同体积SOD生理盐水稀释液(100 mg/L)后,分别测量这两个时段内牙齿表面电位,得到生理盐水(NS)组值及SOD组值。
2 结 果 2.1 第一组测试结果见表1。
表1 菌斑牙面与非菌斑牙面生物电位的比较 (mV, ±s)
| 组别 |
n |
电位值 |
t |
P |
| 实验组 |
53 |
-111.08±78.19 |
|
|
| |
|
|
11.92 |
<0.001 |
| 对照组 |
53 |
-3.25±3.91 |
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| 2.2 第二组测试结果及方差分析见表2、3。
表2 生理盐水及SOD对菌斑牙面电位的影响 (mV, ±s) |
| 分组 |
n |
电位值 |
| 对照组 |
30 |
-141.97±62.97 |
| 生理盐水组 |
30 |
-122.87±56.03 |
| SOD组 |
30 |
-54.87±30.82 |
| 来源 |
离差平方和 |
ν |
均方 |
F值 |
P |
| 总体 |
359 358.1 |
89 |
|
|
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| 处理组间 |
125 752.2 |
2 |
62 876.10 |
37.96 |
<0.01 |
| 单位组间 |
172 342.1 |
29 |
5 942.83 |
3.59 |
<0.01 |
| 误差 |
61 263.8 |
58 |
1 656.27 |
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| 2.3 SNK法对第二组数据进行两两比较,对照组及SOD组与NS组相差均非常显著,而对照组与NS组相差不显著。结果见表4
表4 3组生物电位之间两两比较 |
责任编辑:姚红祥 |