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此外，如果增加或减少LP的量，LP抑制GtfD的作用则消失。提示，两种酶（LP和GtfD）之间的比例起着重要作用（图3）。
图2 过氧化物酶及其底物对GtfD 活性作用 （pH 6.5）。GtfD与5μg LP孵育, 或与5μM, 200μM H2O2 孵育，或与 0.01 mM, 1.0 mM KSCN孵育, GtfD 活性测定如文中所述。数值代表：均值±标准差 (n=3)。
图3 过氧化物酶对GtfD 活性作用（ pH 6.5）。GtfD的反应混合物中加入不同重量的LP (0-10μg)，GtfD 活性测定如文中所述。数值代表：均值±标准差 (n=3)。
讨 论
本研究结果提示，过氧化物酶系统生成的低硫氰酸盐对变形链球菌GtfD没有作用，而乳过氧化物酶本身则抑制GtfD活性。但是，如果LP与其底物硫氰酸盐和/或高浓度H2O2结合，则GtfD活性增加。
许多获得性膜和菌斑中的唾液大分子在液相条件下能增强葡糖基转移酶的活性。这些大分子包括宿主源的，如分泌型IgA、磷酸蛋白质、血型反应性物质、磷脂以及细菌源的，如核糖核酸等［5，10，11］。随着变形链球菌葡糖基转移酶基因的分离及表达，可获得更纯、更满意、更可信赖的Gtf酶，这些手段有助于更精确地研究、鉴定菌源性酶和唾液各组份的相互作用。Venkitaraman等［2］（1995）报道，液相Gtf酶与吸附于羟磷灰石表面的Gtf酶性能不同，并指出，GtfD所形成的水溶性葡聚糖作用之一是作为GtfB形成水不溶性葡聚糖的前体［2］。
本实验表明，LP单独与GtfD（重量比1:1）孵育时抑制GtfD活性，而如果改变LP的量，则LP介导的抑制作用消失。其抑制机制尚不清楚，可能是LP以某种形式与GtfD相结合，抑制了GtfD活性。有学者提出，酶附着于固体表面，其构象可能发生改变，导致酶活性位点发生变化。在我们检测中，当LP与GtfD相结合时，就可能发生了GtfD活性位点的构象变化。LP若与底物共同作用于GtfD，则增加了GtfD活性，可能是LP更易与其底物特异性结合，发生相应的构象变化，阻断了与GtfD结合的有效位点，从而阻断了LP对GtfD的抑制作用, 甚至增加GtfD活性。
过氧化物酶系统所有组份都是唾液中的正常成分［12，13，14］。口腔中SCN-很快被过氧化物酶利用产生抗微生物因子HOSCN和OSCN-，该因子与口腔细菌相互作用。因此， 唾液SCN-对口腔过氧化物系统而言更加重要，对LP-SCN-联合作用于GtfD而言则不显重要。
本文结论为，过氧化物酶产生的抗微生物因子HOSCN/OSCN-并不抑制GtfD活性，而LP酶本身在低浓度时就抑制了GtfD活性。我们认为，这是由于LP与GtfD以某种方式结合，抑制了与龋病相关的变链菌分泌的GtfD，这是否仍发生于获得性膜结合的酶尚在研究之中。
本研究由芬兰科学院、芬兰牙科学协会和中国留学基金委资助。
［作者简介］ 于晓霞(1963～)，女，黑龙江哈尔滨市人，硕士，副主任医师，1998年赴芬兰尔库大学牙科研究所龋病部，美国纽约罗切斯特大学龋病研究中心齿科研究部研修，研究方向：唾液抗微生物因子。
于晓霞（哈尔滨医科大学口腔医学院， 黑龙江 哈尔滨 150001）
参考文献
［1］ Colby SM, McLaughlin RE, Ferretti JJ, et al. Effect of inactivation of gtf genes on adherence of streptococcus downei. Oral Microbiol Immunol, 1999; 14: 27-32
［2］ Venkitaraman AR, Vacca-Smith AM, Kopec LK, et al. Characterization of GlucosyltransferaseB, GtfC, and GtfD in solution and on the surface of hydroxyapatite. J Dent Res, 1995; 74: 1695-1701
［3］ Tenovuo J. Nonimmunoglobulin defense factors in human saliva. In: Tenovuo J, ed. Human Saliva: Clinical chemistry and Microbiology. Vol II, CRC Press Inc., Boca Raton, Florida, USA, 1989; 56-91
［4］ Mansson-Rahemtulla B, Rahemtulla F, Humphreys-Beher MG. Human salivary peroxidase and bovine lactoperoxidase are cross-reactive. J Dent Res 1990; 66: 1839-1846
责任编辑：姚红祥 | 
