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| *由表1中Σ[L组-(SOD+L组)]/19演算而得。
2.实验2得出15例患者的对照组,加生理盐水组和加SOD组共3组数据,相互间有差异(表3)。
表3 生理盐水及SOD对龋变牙面电位的影响( ,mV) |
| 分 组 |
例数 |
电 位 |
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| 对照组 |
15 |
-232.122±35.29 |
* |
| 生理盐水组 |
15 |
-228.620±22.89 |
** |
| SOD组 |
15 |
-147.058±27.32 |
*** |
*对照组与生理盐水组之间相差不显著,P>0.05 **生理盐水组与SOD组之间相差极显著,P<0.01 ***对照组与SOD组之间相差极显著,P<0.01 讨 论 1.活性氧(包括羟自由基、超氧化物阴离子自由基等)与化学发光剂Luminol(3—氨基邻苯二甲酰肼)反应,使之激活,当它返回基态时,就向外发光,利用发光光度计可进行计数;超氧化物歧化酶能特异性抑制超氧化物阴离子自由基,所以能抑制超氧化物阴离子自由基引起的Luminol发光。根据被测物发光强度是否被抑制及抑制的程度,从而可间接检测出超氧化物阴离子自由基的含量。这就是实验1的原理。实验1结果表明:实验组(龋变组织)和对照组(唾液)均含有超氧化物阴离子自由基,但实验组中超氧化物阴离子自由基的水平远远高于对照组,两组之间的抑制发光值相差为15.64/0.17=92倍,表明两组间超氧化物阴离子自由基含量相差近100倍,龋变组织内自由基的含量显著高于唾液(P<0.05)。自由基的特点是具有未配对的电子,这种未配对的电子很容易脱离自由基的电子轨道而成为自由电子。自由基的大量存在即表明自由电子的大量存在,而自由电子的大量存在必然会使龋变组织形成Eh负电位,成为原电池的阳极,产生腐蚀电子流通向龋洞底部牙齿组织,促使龋变不断向牙髓发展。 2.为进一步证实上述设想,证实自由基与龋变牙面Eh负电位的关系,本研究设计了实验2。实验2利用SOD有特异性清除超氧化物阴离子自由基的特性,观察用SOD液滴入龋洞内将自由基基本清除后Eh负电位值是否会随之减小,从而证实自由基与Eh负电位的客观关系。表3的结果说明:在不中断牙齿表面电位测量的情况下,龋洞内滴入生理盐水,Eh负电位无显著变化,而一旦滴入SOD液,使龋洞内自由基得到基本清除,则Eh负电位迅速减小,Eh从负向正转化。应用SNK检验进行组间两两比较表明:加SOD组的Eh负电位,极显著地小于对照组和加生理盐水组(P<0.01)。 3.本研究实验1证实了出现Eh负电位的龋变组织含有比唾液高出近100倍的超氧化物阴离子自由基,实验2证实用SOD清除龋变组织内自由基可以极显著地减小Eh负电位,两个实验相互联系,相互补充,证明龋变牙面出现Eh负电位的机理是由于龋变组织内含有大量超氧化物阴离子自由基,这些自由基带有的未配对的、容易脱离自由基电子轨道的电子,是形成Eh负电位的物质基础。 4.自1890年Miller提出化学细菌学说以来,人们把酸脱矿当作产生龋病的唯一机理。本项研究所获得的新的实验事实,是在20世纪末人类科学技术水平已有极大提高之后,应用电子学、电化学和自由基生物学等现代科学理论技术获得的。这些实验事实至少能提醒人们,研究龋病机理,除了考虑酸脱矿之外,也应该考虑过去没有注意到的生物电、电化学腐蚀、自由基的组织破坏作用等因素。有人提出:龋变牙面出现Eh负电位,含有高浓度超氧化物阴离子自由基,是龋变的原因,还是龋变的结果?本文对这一问题还不能作结论。阎鹏的《龋变组织和牙菌斑内自由基含量与牙面氧化还原电位(Eh)关系的实验研究》中,已经证实了引起龋病发病的牙菌斑中也含有高浓度超氧化物阴离子自由基,它也可以引起菌斑牙面出现Eh负电位,而且,这种Eh负电位也可以用SOD将其减小。这方面的研究结果,将另文报道。
注:本课题由国家自然科学基金资助(3870830)
作者单位:710032西安第四军医大学口腔医学院口腔预防医学教研室(黄力子、王成龙、阎鹏、李振钢、关素敏、唐荣银、李刚),基础部化学教研室(王多宁。)
责任编辑:姚红祥 |