表1　血清中特异性抗抗原Ⅰ/Ⅱ抗体水平
 

分组	动物数 (只)	IgA(OD405nm)	IgG(OD490nm)
抗原Ⅰ/Ⅱ组	10	0.121±0.026	0.669±0.042**
全细胞组	10	0.109±0.029	0.551±0.034*
对照组	10	0.083±0.025	0.412±0.038

注：与对照组比较， * P<0.05，** P<0.01 　　2.唾液中特异性抗抗原Ⅰ/Ⅱ抗体水平：ELISA结果显示：抗原Ⅰ/Ⅱ皮下免疫组唾液中特异性抗抗原Ⅰ/Ⅱ-IgA抗体水平显著高于对照组(P＜0.01)；全细胞免疫组唾液中IgA抗体水平与对照组比较，差异无显著性(P＞0.05)；唾液中特异性抗抗原Ⅰ/Ⅱ-IgG抗体水平，三组间在统计学上差异无显著性(方差分析结果，P＞0.05)(表2)。 表2　唾液中特异性抗抗原Ⅰ/Ⅱ抗体水平

　　注：与对照组比较，* P<0.01
讨论

　　变链菌被公认是实验动物和人类主要的致龋菌［1］。基于龋病是细菌感染性疾病这一认识，人们在不断寻找一种简单有效且安全可行的保护宿主预防龋齿的免疫手段。近二十年来学者们对免疫防龋进行了大量研究。早期一些学者曾用变链菌全细胞抗原免疫啮齿类动物取得成功。随后，用纯化的抗原免疫灵长目动物，有效地诱导出了保护性抗体产生，降低了龋齿的发生。另外还有研究表明，用特异性抗表面蛋白质抗原的单克隆抗体也能有效地阻止变链菌定居到牙齿表面，从而预防龋齿发生［2，3］。以上研究表明，用主动或被动免疫方法均能产生防龋效果。
　　通过生化、遗传及免疫学研究已经发现，变链菌表面存在着许多毒力因子，后者在免疫防龋中具有一定作用。人们在寻求一种安全有效的防龋疫苗时，主要从两方面考虑。第一，疫苗应是安全的免疫原，且能有效地刺激抗变链菌免疫应答反应。目前已应用的免疫原有：灭活或未灭活的变链菌全细胞、细胞壁、核糖体和经过纯化的抗原。虽然用变链菌全细胞免疫动物可以诱导唾液和血清中特异性抗体产生［9］。但有学者研究指出，变链菌全细胞可能同时诱导心脏交叉反应性抗体形成。因而，研究的焦点集中于纯化的抗原，如葡糖基转移酶(GTF)、葡聚糖结合蛋白(GBP)和表面蛋白质抗原的Ⅰ/Ⅱ(或称B 、PI、PAc、SR)等亚单位疫苗，其中抗原Ⅰ/Ⅱ是最有前途的候选抗原［10］。第二是抗原免疫途径。常用的有在唾液腺区域局部注射，全身性免疫或经口腔免疫等途径。对不同动物的免疫途径不同，免疫效果也各异。
　　本研究用纯化的变链菌表面蛋白质抗原Ⅰ/Ⅱ与福氏佐剂免疫BALB/c小鼠，观察是否能诱导其唾液和血清中产生特异性抗抗原Ⅰ/Ⅱ抗体，同时用变链菌全细胞免疫组作对比。ELISA结果显示，抗原Ⅰ/Ⅱ皮下免疫组的血清中特异性抗抗原Ⅰ/Ⅱ-IgG抗体水平和唾液中特异性抗抗原Ⅰ/Ⅱ-IgA抗体水平，与未免疫对照组比较，差异有显著性(P＜0.01)(表1，2)。Lehner等［11］用纯化的抗原Ⅰ/Ⅱ对猴进行皮下免疫，检测到血清中IgG抗体水平显著增加，与未免疫猴比较，差异具有非常显著性(P＜0.01)；而唾液中的IgA水平虽有增加，但与对照组比较差异无显著性(P＞0.05)。还有报道用含有抗原Ⅰ/Ⅱ决定簇的小分子肽对猴进行全身免疫，也表明血清中IgG抗体水平升高［6］。我们的实验除了诱导产生血清特异性IgG抗体外，还诱导出局部免疫作用，即唾液中产生特异性IgA抗体。
　　变链菌全细胞免疫组血清中IgG的抗体水平与对照组比较，显著升高(P＜0.05)(表1)，此结果与国外研究报道一致。但全细胞组诱导的血清IgG抗体水平较抗原Ⅰ/Ⅱ组低且未能诱导唾液中特异性抗体产生(表2)。
　　抗原Ⅰ/Ⅱ免疫组与全细胞免疫组比较，其血清中特异性IgG抗体水平和唾液中特异性IgA抗体水平均显著升高，说明抗原Ⅰ/Ⅱ的免疫原性较变链菌全细胞强，应被视为一种有使用价值的亚单位防龋疫苗。

责任编辑：姚红祥