【摘要】　目的　检测涎腺腺样囊性癌对抗癌药物的 敏感程度。方法　采用MTT法测试了14种抗癌药物对SACC-83、ACC-2 和ACC-M等3个体外培养的涎腺腺样囊性癌细胞株的杀伤作用强度。结果　3种细胞株对14种药物的敏感性大体相似而又有差别，在抗代谢类抗肿瘤药物中，对MT X、DNR、ADM、5-Fu、MMC的敏感性较强，在植物来源的抗癌药物中，对Taxol有明显的敏感 性。结论　药物敏感性测定对临床选用有效的治疗涎腺腺样囊性癌药 物具有一定的价值。
　　【关键词】　腺样囊性癌　　化学敏感试验　　MTT分析法

　　腺样囊性癌是涎腺常见的恶性肿瘤，在手术治疗的同时，应用化疗 药物对提高治疗效果及防止远隔脏器转移具有重要意义。但由于药物选择性差，同时由于肿 瘤病理组织学分型、生长方式及分化程度不同，对各种化疗药物的敏感性也存在着差异。为 了更有效地应用已知的抗癌药物，预测腺样囊性癌对药物的敏感性，指导临床治疗以提高疗 效，我们选用了3种腺样囊性癌实体瘤细胞株，用MTT(四氮唑盐)法进行了肿瘤细胞体外药物 敏感性试验。

材料和方法

　　1.细胞系：人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83为本院建立，ACC-2及高转移细胞 株ACC-M引自上海第二医科大学口腔医学院。常规培养于含15%小牛血清的RPMI-1640培养液 中。
　　2.化疗药物及浓度设定：ADM(阿霉素，意大利 FARMI TALTR CRRLOERBALtd生产)；CDDP(顺 铂，山东德州制药厂生产)；5-Fu(5-氟尿嘧啶，上海旭东海普药业有限公司生产)；DNR(柔 红霉素，意大利FARMITALIA CARLO ERBA 生产)；MMC(丝裂霉素，日本协和发酵工业株式会 社生产)；MTX(氨甲蝶呤，上海华联制药有限公司生产)；Ara-C(阿糖胞苷，上海华联制药有 限公司生产)；PYM(平阳霉素，天津市河北制药厂生产)；VCR(长春新碱，上海华联制药有限 公司生产)；HRT(三尖杉脂碱，北京协和药厂生产)；HPT(羟基喜树碱，黄石飞云制药有限公 司生产)；Taxol(紫杉醇，中国医学科学院药物研究所提供)；Vp-16(鬼臼乙叉甙，北京制药 工业研究所实验药厂生产)，榄香烯乳(大连金港制药有限公司生产)。以上14种药物根据抗 肿瘤药体外实验用常用参考浓度［1］及参考下述公式推算 ［2］：
　　
　　每种药物设置4个浓度。
　　3.药物敏感性MTT测定法：将处于指数生长期的肿瘤细胞加入适量Trypsin-EDTA液，使贴壁 细胞脱落配成悬液，按每孔2×103个(100μl)接种于96孔平底培养板中，将平板置37℃、 5%CO2、100%湿度培养箱中24小时后，加入含有不同浓度受试药物的培养液100μl，每个 药物不同浓度设平行的三个孔，对照组加不含药物的培养液100μl，再放入培养箱中孵育72 小时，用快速翻板法倒掉培养液，每孔加入用无血清1640按0.4μg/ml配制的MTT溶液10 0μl，温育4小时，使MTT还原为甲月　替，再次倒 掉上清液，每孔加DMSO(二甲基亚枫)150μl，用平板摇床摇匀后，使用酶标仪(日本产，BID -RAD550型)在570nm波长处测定、打印每孔的OD(光密度)值。
　　4.统计分析：各药物等级重复孔计算OD值均数，并按以下公式计算抑制率：
　　
　　用krber法计算出各种药物的细胞半数抑制浓度(IC50)；
　　根据临床每日常规用药剂量按以下公式计算出体外试验用药物浓度［3］：
　　体外试验药物浓度(μg/ml)=(50×D)÷5000÷50%×103；
　　D：临床用药剂量(mg.kg-1/day)，按每毫升含细胞培养液加50μl体外试验药物浓度 计算剂量。临床用药剂量参照文献［1］，取静脉注射用量的平均值。
　　体外试验药物浓度＞IC50为敏感；体外试验药物浓度＜IC50为不敏感或耐药， 并计算出二者的比值(敏感强度)。

结　　果

　　一、抗癌药物对三个细胞株的抑制作用：根据OD值求出药物对癌细胞的抑制率， 并计算出IC50值(表1)。

表1　14种抗癌药物对三个细胞株的杀伤作用 

责任编辑：姚红祥