……(上接14卷第1期)
　　二、抗癌基因研究方面
　　抗癌基因又称肿瘤抑制基因(抑癌基因)，存在于正常细胞中，具有与癌基因相拮抗的作用，能抑制肿瘤的形成和生长，而抗癌基因的异常则与人类肿瘤的发生有关。由于抗癌基因的作用一般是在两份等位基因都丢失或失活后方能显示，故发现和分离较困难，至今分离和肯定了的有十几个。与涎腺肿瘤关系密切的抑癌基因有p53基因、Rb基因等。
　　1.p53基因
　　p53基因位于人类第17号染色体短臂(17-p13.1)约16～20Kb长，由11个外显子和10个 内含子组成，第一个外显子不编码，距2～11个外显子8～10Kb。在其编码区内有5个高度保 守区域，即13～19、117～142、171～181、234～258、270～286，其中以175、248、249、2 73、282密码子的突变频率最高，称为突变热点，其突变频率依肿瘤的不同而异。P53蛋白是 由393个氨基酸组成、分子量为53KD的核酸蛋白，可能是通过参与细胞周期的负调节而调控 细胞的增生、分化。p53基因异常包括17p等位基因的缺乏、失活和点突变。p53基因结构和 表达的异常，是迄今为止人类肿瘤中最常见的基因改变之一。p53基因又分为突变型和野生 型两种，野生型p53基因在维持细胞正常生长、抑制恶性增殖中起着重要作用。野生型p53是 细胞生长的“监控器”，在细胞受到射线或某些药物作用而发生DNA损伤的情况下，能使细 胞分裂终止在G1/S期，以使细胞有足够的时间修复损伤，而恢复正常状态。若损伤不能修 复，野生型p53还能启动细胞程序化死亡过程引起细胞的自尽，从而保证有癌变倾向的细胞 不再继续存活下去。突变型p53不仅失去了正常野生型的生长抑制作用，反而出现促进恶性 转化的活性，由抑癌基因转变为癌基因。野生型p53的生化功能是作为mDm2、GADD-45、WA F1和C2P1等基因的转录激活剂来调节细胞的生长和分化，调节的途径一是通过DNA复 制启动复合物的组装和功能，对细胞进入S期进行负调控；二是p53基因可能是某些抑制细胞 增殖基因的反式激活因子，从而对细胞分裂进行负调控。Harper、Euedge等研究发 现p53抑制生长功能的分子机理与WAF1/C2P1有关。细胞周期的运行主要依赖于细胞周 期素依赖激酶cdks，该酶只有与细胞周期素结合才有活性，促使细胞通过各个时期的限制点 ，完成顺序的时期转换，其中以cdk2最重要，是G1-S转换所必需的。现知一种WAF1/C 2P1的基因可抑制cdk2活性，从而阻碍细胞进入DNA合成期，使细胞不能进行有丝分裂 。野生型P53蛋白是一种转录因子，可调控某些基因的表达。研究证实，它可诱导WAF1/C2P1基因产生分子量为21KD的蛋白质，这种蛋白可抑制cdk2酶活性，从而阻碍细胞进入DNA合成期，使细胞无法分裂。此外p21也可和PCNA(增殖细胞核抗原)结合，抑制细胞DNA 复制。
　　目前对p53的生长抑制效应有两种说法：一种是P53蛋白使细胞暂时停滞于G1期，在P53蛋 白诱导产生的抑制物消失后，这一作用即消失；另一种认为p53引起的生长停滞是永久的， 结果引起细胞的凋亡。我们在涎腺粘液表皮样癌阿霉素诱导凋亡的实验研究中发现阿霉素诱 导凋亡时，P53蛋白的表达增加了，增加的应为野生型p53，因为野生型p53是诱导凋亡和促 进凋亡发生的，而突变型p53的表达失调既不诱导凋亡又不能改变白血病细胞对凋亡诱导处 理的易感性。Debbas等发现腺病毒E1B55K蛋白阻断P53抑癌蛋白作用，表达p53可通 过E1A间接引起细胞凋亡，而突变型p53阻断了细胞凋亡，当p53回到野生型形态时又出现 了凋亡。p53产物使细胞增殖停止，而代以触发细胞呈分化状态。在许多细胞系内，分化等 于死亡。
　　自1979年Lane和Crawford用免疫方法首先在SV40感染的小鼠细胞核中发现p53基因以 来，人们对p53基因在人类肿瘤中的作用做了较多的研究。大量研究表明，p53基因的丢失、 突变甚至重排都广泛存在于肿瘤组织和培养的肿瘤细胞中，突变频率高达50%，显然p53突变 与人类肿瘤的发生发展密切相关。Soini研究表明p53在涎腺癌中的阳性率(22%)明显低于肺 癌阳性率(63%)，其中14例粘液表皮样癌中仅有3例p53阳性，3例未分化细胞癌中有2例阳性 表达。王洁等的研究发现p53基因突变及其产物的累积在涎腺肌上皮癌的形成过程中起着重 要作用。Azuma等用一种使瘤细胞选择生长的培养方法，对来自涎腺多形性腺瘤的标本用免 疫组化方法观察了p53、c-myc、ras、 mos的表达，提示p53突变在唾液腺的多形性腺瘤的发 展中起一定作用。也有学者在粘液表皮样癌的研究中表明，p53蛋白异常表达率是较低的， 而p53总阳性率则较高，p53在低分化粘液表皮样癌中的阳性率大于中、高分化粘液表皮样癌 ，说明p53的阳性表达与肿瘤的分化程度有关，分化越差，阳性率越高。我们的研究表明在 腺样囊性癌中p53有较强表达，提示两者关系密切。

责任编辑：姚红祥