【摘要】　目的　观察血管生成抑制剂TNP-470对人涎 腺腺样囊性癌肺转移的抑制作用。方法　将腺样囊性癌ACC-M细胞接 种于裸鼠尾静脉(1×106/鼠)。将20只裸鼠随机分成对照组和治疗组，自第2天起分别给予 溶剂(3%酒精)和TNP-470(40mg/kg)，隔天给药1次，共用4周。接种后6周末处死动物，检测 对照组和治疗组的肺转移率及含转移灶的肺重量，观察转移情况。结果　对照组和治疗组肺转移率分别为90%和40%(P＜0.025)；含转移灶的肺重量分 别为0.2138g±0.0667g和0.1685g±0.0445g(P＜0.05)。结论　血管生成抑制剂TNP-470能明显抑制腺样囊性癌的肺转移。
　　【关键词】　腺样囊性癌　　血管生成抑制剂　　TNP-470　　 肿瘤转移

　　腺样囊性癌是口腔颌面部常见的恶性肿瘤，易发生远处转移，转移 部位以肺部最多见。自七十年代Folkman提出“三维空间生长的实体瘤在2mm3以后是绝对 血管生成依赖性的”以及“抑制肿瘤的血管生成可导致抑制肿瘤转移”的假说之后，抗肿瘤 血管生成剂在抑制肿瘤转移中的作用日益引起重视。TNP-470是近年来发现的半合成的烟曲 霉素衍生物，有较强的抗血管生成活性，据报道，对多种肿瘤的生长具有抑制作用［1 ，2］。我们对TNP-470抑制腺样囊性癌的转移进行了实验研究，旨在探讨一种抑制腺样囊 性癌转移的方法。

材料和方法

　　1.实验材料：①细胞株：选用经过筛选并克隆化的肺高转移性腺样囊性癌ACC-M 细胞株，由上海第二医科大学口腔医学院提供；PRMI-1640+15%小牛血清37℃密闭培养。② 动物：3周龄雌性BALB/C nu/nu裸小鼠，由中国医学科学院实验动物研究所繁育场提供，SFP 条件下饲养。③药物：TNP-470，烟曲霉素衍生物(日本OsaKa,Takeda化学公司Miyashita.O 和Ikeda.H博士惠赠)，其结构参见文献［3］。
　　2.实验方法：①细胞悬液：取体外培养的并处于指数增长期的ACC-M细胞，经0.125%胰 酶消化，吹打成细胞悬液，经苔盼蓝染色确认活细胞达95%以上，经1000r/min离心5min，弃 去上清，加入Hank’s液，吹打后再经离心，重复3次。用Hank’s液调整细胞数为5×106/ ml。②肺转移模型：将裸鼠放入固定器中，在严格无菌条件下经尾静脉注入细胞悬液0.2 ml(1×106个细胞)。③治疗：将20只裸鼠随机分成对照组和治疗组，两组裸鼠体重差异 无显著性(15.44±0.86，15.58±0.66；t=0.28，P＞0.5)。 用药剂量参照Kusaka等［4］的方法，治疗组给TNP-470(40mg/kg)，对照组给相应溶 剂(3%酒精)，皮下注射给药。接种后第2天起，隔天给药一次，共4周。④疗效观察：给药期 间观察裸鼠的一般状况，于接种后第6周末断颈处死裸鼠。称体重后解剖出肺脏，用电子天 平称重，再将其用Bouin氏液(饱和苦味酸75ml+40%甲醛25ml+冰醋酸5ml)固定。48小时后观 察，肺组织呈黄色，肿瘤转移灶成白色隆起。于解剖显微镜下计数肿瘤转移灶的大小及数目 ，最后进行组织病理学检查。⑤两组间裸鼠体重及肺重用t检验，肺转移率用χ2检验。

结果

　　1.两组肺转移率及转移结节：对照组10只裸鼠中有9只发生了肺转移，治疗组10只 中有4只发生了肺转移，经χ2检验，两者差异有显著性(P＜0.025)。对照组9只 肺表面转移结节数为27±8个，用药组4只结节数仅为12±6个，可见用药组的转移结节数目 也明显低于对照组。
　　2.含转移灶肺重：对照组含转移灶肺重0.2138g±0.0667g，用药组0.1685g± 0.0445g；用药组肺重明显小于对照组，二者差异有显著性(P＜0.05)。
　　3.组织病理学检查：对照组裸鼠肺表面及实质内可见明显转移瘤灶，体积大，细胞排列成实 性团块，细胞呈园形或多边形，排列紧密，胞浆染色较浅，嗜伊红。细胞核园形，核分裂多 见；染色质排列疏松。瘤块中央细胞有变性坏死。肺小淋巴结及小支气管内亦可见转移瘤灶 形成。用药组肺转移灶数量少，体积明显减小，多位于肺表面，瘤细胞体积小，细胞之间有 裂隙，核分裂少，肺内小淋巴结及小支气管内未见转移瘤灶形成。

责任编辑：姚红祥