［摘　要］　目的　评价灯盏细辛(HEr)的抗白斑癌变效果并探寻血管生成的机理，考察α-SMA检测诊断癌变进程的价值。方法　金地鼠150只，分模型组、HEr组各66只，空白对照组18只，Salley法诱导金地鼠颊囊白斑癌变，以HEr干预，采用墨汁灌注图像分析、微血管树脂铸形、α-SMA免疫组化染色与组织病理对照动态观察其变化规律。结果　HEr组较模型组白斑癌变率下降1倍，正常细胞率是模型组的近4倍。α-SMA平均值达65.76，明显高于模型组(P<0.001)。血管面积比值和血管密度值在模型组和HEr两组间均无显著差异,P>0.05，但树脂微血管铸形显示形态和空间构筑近于空白对照组。结论　HEr确有防止白斑癌变作用，其机理可能与上调α-SMA表达水平有关。HEr对白斑癌变过程中血管增生和扩张无明显影响，但对血管构形、空间配置和血管壁的完整性有保护作用。
［关键词］　 灯盏细辛；白斑癌变；血管生成;金地鼠颊囊粘膜;α-SMA表达

　　 口腔粘膜白斑既是临床多见的口腔粘膜疾病，又是具有潜在高癌变倾向的癌前病变［1］。寻找阻断白斑癌变的有效药物，不仅对防治白斑，降低口腔癌的发病率有重要意义，而且可对人体中与口腔粘膜结构相似但解剖部位隐蔽的其它粘膜来源肿瘤(如食道癌、子宫癌等)的防治提供参考。
　　灯盏细辛又名灯盏花(Herba erigerontis, HEr)，具有散寒解表、活血化瘀，祛风除湿功效；有扩张脑血管、冠脉血管和外周血管，改善微循环的药理作用，被广泛用于中风、冠心病等心脑血管疾病，以及口疮和牙列不齐快速矫治等治疗［2-5］。然而，对HEr在阻断口腔粘膜癌前病变方面的作用及其对血管生成影响的研究尚未见报道。本文采用金地鼠颊囊白斑癌变模型，用HEr实行干预，联合应用组织病理、墨汁灌注、微血管树脂铸型和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)检测等方法进行观察研究，旨在评价HEr防治白斑癌变的效果,动态观察其对癌变过程中血管生成的影响，探讨该药的抗癌机理；考察运用α-SMA检测判断癌变进程阶段的价值，为临床应用提供实验依据。

1　材料和方法

1.1　实验动物及分组
　　实验动物：叙利亚品系地鼠品种的金黄地鼠共150只，清洁级。由上海西普尔-BK实验动物有限公司提供。3周龄，体重0.08-0.1 kg。在空气流通、室温23℃-26℃，相对湿度75%-85%的环境下分笼饲养。每笼6只。用该公司出品的金地鼠全价营养颗粒饲料饲养。
　　分组：实验动物随机分为3组：(1)模型组66只。常规饲养12周后涂二甲基苯丙蒽(dimethylebenzanthracene, DMBA) 4-9周，分别处死，每周11只。其中1只作微血管树脂铸形。8只双侧作α-SMA检测，2只双侧作墨汁灌注图像分析。后两项之标本同时作病理观察。(2)灯盏细辛(HEr)组66只。除前12周以EHr流浸膏稀释液灌胃外,其余处置同模型组。(3)空白对照组18只。不服HEr，不涂DMBA。同期每周处死3只。上述3项检测各1只，病理观察标本为2只双侧。
1.2　动物模型制作
　　化学致癌剂：自行配置0.5%DMBA丙酮液。
　　操作步骤：按Salley法常规操作［6］。
1.3　病理观察
　　巨体病理观察：颊囊粘膜充血、糜烂、白斑、肿块出现的时间范围以及动物饲养情况和死亡原因。双人复核，填写记录表。
　　组织病理观察和上皮异常增生分级诊断：常规切片HE染色，高倍光镜下观察，每例3个视野。双人复核，按1972年WHO口腔癌前病变协作中心12条诊断标准和Banoczy经验判断法给予分级诊断。所有病理观察均采用双盲法［1］。
1.4　墨汁灌注和图像分析
　　墨汁灌注：氯氨酮麻醉下开胸暴露心脏，经左心室插管至升主动脉，丝线结扎固定后再结扎降主动脉，切开右心房，以加有肝素的温热生理盐水冲洗头颈部血管，至右心房流出液清亮。将自行配置的3%明胶墨汁液灌注至头颈部皮肤和口腔粘膜、牙龈、舌体呈黑色。取下双侧颊囊涂DMBA区组织块，10％甲醛固定，石蜡包埋，HE染色。

责任编辑：姚红祥