［摘要］　目的：建立金黄地鼠诱发性舌癌模型，并观察颈淋巴结转 移。[ HTH〗方法：通过二甲基苯并蒽（DMBA）涂抹金黄地鼠舌粘膜的同时分别使用刺破 粘膜和切割诱发肿瘤，每周二次，共25周. 结果：涂药组成瘤率95%（38/4 0），动物均经历了上皮异常增生、原位癌、浸润癌和转移癌几个阶段，3只实验组金黄地鼠 出现颈淋巴结转移。组织学呈高分化鳞状细胞癌表现。结论：DMBA能诱发 金黄地鼠舌癌形成，局部创伤促进舌癌形成和颈淋巴结转移。
［关键词］　癌形成；　动物模型；　淋巴结；　转移

　　舌癌模型建立对研究舌癌发生机理,生物学和治疗学方面起着重要作用。Salley首先报 道了用二甲基苯并蒽涂布金黄地鼠颊囊成功地诱发了颊囊癌的产生。由于舌的特殊结构和生 理功能，一般认为诱发舌癌的产生较颊囊癌更难。作者通过长达25周的实验，成功地建立了 金黄地鼠舌癌动物模型，并有颈淋巴结发生转移。现报道如下：

材料和方法

　　1. 材料
　　二甲基苯并蒽（7,12-dimenthylbenzanthrancene,DMBA）购于美国Sigma公司，溶解于 分析纯的丙酮中，浓度为0.5%(w/v)，闭光保存。
　　鼠架，普通牙科拔髓针，毛笔。
　　2. 动物及分组
　　实验组：40只金黄地鼠（购于卫生部成都生物制品研究所）。体重90g～120g,雌雄各半,6 ～8周龄。在干燥，空气流通,12h光暗交替的条件下自由进食水，肿瘤晚期辅以鸡蛋以加 强营养.
　　对照组： 5只，涂布丙酮液。
　　3. 实验方法
　　将金黄地鼠固定与自制的鼠架上,拉开上下牙,牵开鼠舌向左,暴露右侧舌缘中后1/3交界处, 用棉签拭干涂布部位舌粘膜，普通毛笔蘸药后分别涂布右舌粘膜, 吹干后再涂，然后吹干. 实验过程中,不同时期典型病变鼠处死8只,即时补充,处理方法相同，勿需麻醉.所有动物涂 擦后禁食禁水2h,每周涂药二次,共20周，18周开始在肿瘤四周进行切割，观察至25周。
　　4. 观察指标
　　肉眼观察:各组动物肉眼观察并记录各时间段舌粘膜的变化,包括粘膜糜烂、水肿、充血 、增厚、粗糙度、白斑、溃疡、新生物、舌活动度、邻近组织反应、颌下淋巴结是否肿大及 全身情况.25周断颈处死.
　　光镜观察:分别切取局部组织,颌下淋巴结,胃肠道、肝、肺组织固定于10%福尔马林,常规包 埋,切片, HE染色,显微镜下观察.

结　果

　　1. 肉眼观察
　　对照组：5只金黄地鼠左侧舌缘,未见包块和新生物,粘膜完整,红润光滑,有弹性，与邻近组 织无差异，舌运动自如。
　　40只动物实验过程中处死8只,所补充的动物涂药后经历了与其他金黄地鼠相似的病程。
　　5～8周:首先充血水肿,继之糜烂,糜烂面不规则, 可愈合。涂擦时表面呈片状脱落形成创面 ，容易出血,少许白色斑块病损，舌粘膜光泽消失，现粗糙,粘膜弹性尚可,舌动度好,动物精 神状况好,自由进食.
　　10～13周:舌粘膜弹性降低,粘膜增厚,白色斑块样病损，显粗糙,菜花状新生物，有蒂，基底 宽，乳突状增生,突起,涂药时容易出血,出血时间较长,局部舌粘膜缺少弹性,动度尚可,动物 活泼，能自由进食。
　　17～20周:舌缘溃烂面进一步增大,新生物更大,菜花状突起表面凹凸不平，中心有坏死和假 膜形成。四周白色病损加重,极易出血或自发性出血, 舌活动度降低,切割时出血不易停止。 质地变硬，颌下淋巴结未见肿大，鼠活动减少，对外界反应迟钝。
　　21～25周:溃疡和新生物在基底进一步扩大,生长较快, 溃疡呈弹坑状，凹陷，明显突起,假 膜进一步增多变厚，可自发出血,质地硬,舌活动度差。固定,牵引时有阻力，临近组织反应 大。鼠精神状态差,活动少,进食受限，颌下淋巴结肿大不明显。由于金黄地鼠全身情况差， 精神萎靡，死亡相继出现，不能耐受实验措施的继续实施，因此在25周时结束实验。
　　2. 光镜观察
　　对照组:复层鳞状上皮,各层细胞排列规则,其余上皮类似人口腔舌粘膜。
　　实验组:动物舌粘膜涂药后均经历了上皮增生、原位癌、浸润癌和转移癌四个阶段,组织学呈 高分化鳞状上皮细胞癌表现,有三只动物镜下出现颈淋巴结转移。

责任编辑：姚红祥