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提 要 目的 探讨P53. bcl-2和ki-67在腺样囊性癌（ACC）中的表达及临床意义。方法 应用免疫组化方法，观察20例ACC石蜡包埋组织P53、 bcl-2和ki-67蛋白表达，结果 P53、 bcl-2和ki-67的阳性表达率分别为50％、70％和80％，P53.和ki-67阳性率在不同ACC组织亚型中存有差异(P<0.05），bcl-2阴性表达者3年死亡率高于阳性表达患者（P<0.01），ki-67和bcl-2阳性表达与淋巴结转移有显著性关系（P<0.01）。结论 P53、 bcl-2和ki-67蛋白表达在ACC中起有一定作用，三者间可能有协同关系；P53表达受ACC组织分型及细胞分化程度影响；bcl-2蛋白检测有助于临床预后评估；ki-67蛋白与细胞恶性程度及淋巴结转移有明显相关性。
关键词 腺样囊性癌 癌基因 抑癌基因 细胞凋亡 免疫组化
分子生物学研究揭示，肿瘤的发生是多因素协同作用的结果。癌基因突变和过量表达、细胞凋亡（Apoptosis）的抑制和细胞增殖活性的增强，在涎腺肿瘤中均起有重要作用〔1、2〕。腺样囊性癌（Adenoid Cystic Carcinoma, ACC)是较为常见的涎腺恶性肿瘤，其早期浸润性强，转移率高，预后较差。本实验采用免疫组化方法，检测20例ACC石蜡包埋组织P53、bcl-2和ki-67表达，并探讨其与ACC亚型、淋巴结转移和预后的关系，为该类肿瘤的早期诊断和预后评估提供一定实验依据。
材料与方法
① 组织来源：20例ACC石蜡包埋标本，取自湖北医科大学病理解剖教研室和湖北医科大学口腔医学院1990～1995手术切除组织。术前未行放、化疗,男性12例，女性8例，年龄38～68岁，平均年龄53岁。参照WHO标准，两位高年资病理医师再次确诊并分型（实性型和腺样—管状型）。
② 免疫组化：P53、bcl-2和ki-67抗体及试剂盒均购自福建迈新生物技术开发公司，阳性对照亦由该公司提供，PBS替代一抗作阴性对照，取正常涎腺组织为正常对照。
③ 结果判断：随机选择4个视野（40×），每个视野均观察100细胞中的阳性细胞数，取4个视野的阳性细胞百分率为显色指数，显色指数小于5％为阴性（-），5～50％为弱阳性（+），大于50％为强阳性（++）。
④ 统计学方法：四格表精确概率分析和x2检验。
结 果
ki-67和P53为胞核着色，bcl-2为胞浆着色，染色均呈棕黄色或棕竭色，20例ACC中，P53阳性率为70％（14/20）。其中+:6例，++：8例；bcl-2阳性率80％（16/20），+:6,++:10，ki-67阳性率 50％（10/20），+:7,++:3。P53、bcl-2和ki-67同时阳性者7例均为阴性者2例，P53和bcl-2同时阳性5例，bcl-2和ki-67阳性3例，P53和bcl-2单项阳性分别为2例和1例（图1，2，3）。
  
图1 ACC中P53蛋白表达（++），胞核出现棕色颗粒状物（SP法，40×10）
图2 bcl-2在ACC中表达（++），胞浆见棕色颗粒物质（SP法，20×10）
图3 ki-67在ACC中表达（++），胞核出现棕色染色（SP法，40×10）
P53、bcl-2和ki-67与ACC亚型、淋巴转移和预后关系（表1）
表1 三种蛋白表达与ACC亚型、淋巴结转移及预后关系
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例数 |
P53 |
bcl-2 |
ki-67 |
| 阳性 |
阴性 |
阳性 |
阴性 |
阳性 |
阴性 |
| 实性型 |
12 |
11 |
1 |
10 |
2 |
9 |
3 |
| 腺样—管状型 |
8 |
3 |
5 |
6 |
2 |
1 |
7 |
| 淋巴结转移 |
9 |
7 |
2 |
5 |
4 |
8 |
1 |
| <3年死亡率 |
7 |
5 |
2 |
3 |
4 |
6 |
1 |
P53和ki-67在ACC不同亚型之间的阳性表达率，均有显著性差异（P<0.05)，但bc-2阳性率两亚型间比较无明显差异（P>0.05)，P53阳性率与有无淋巴结转移无明显关系（P>0.05)，但bcl-2和ki-67阳性率，则分别显示出显著性或高度显著性差异（P<0.05和P<0.01)。20例患者中，3年死亡率为35％（7/20），P53和ki-67蛋白性表达对生存期无明显影响（P>0.05)，但bcl-2表达与3年死亡率有明显关系，bcl-2阴性患者死亡率明显高于阳性患者（P<0.01)。9例淋巴结转移组织中，P53、bcl-2和ki-67两种及全部阳性者7例，单独阳性或阴性2例，两者比较无显著性差异（P>0.05)，7例3年死亡病例中，两种和全部阳性者6例，单独阳性或阴性1例，两者间比较亦无差异（P>0.05)。
责任编辑：姚红祥 |