［关键词］　口腔粘膜;鳞状细胞癌;p53;C-erbB-2

　　本文通过对p53、C-erbB-2癌基因蛋白在口腔粘膜鳞状细胞癌(OMSCC)及癌旁形态学上正常的上皮、异常增生的上皮中表达的研究来探讨p53、C-erbB-2在OMSCC发生、发展中的意义。
1　材料与方法
1.1　标本
　　29例OMSCC标本均来自上海第二医科大学附属第九人民医院口腔病理科1995-1997年的档案标本,其中21例标本中存在癌旁正常上皮,19例存在癌旁异常增生上皮。男性22例,女性7例;病理分级鳞癌Ⅰ级17例、Ⅱ级12例。
1.2　方法
　　经4%甲醛固定,石蜡包埋的标本作5μm连续切片,HE及免疫组化染色(ABC法)。鼠抗人p53单克隆抗体、兔抗人C-erbB-2多克隆抗体(DAKO公司),工作浓度分别为1:50、1:100,微波修复抗原,并设阳性及阴性对照。
1.3　结果判断
　　细胞核内出现棕黄色颗粒为p53阳性;细胞膜或细胞浆出现棕黄色颗粒为C-erbB-2阳性。统计处理采用χ2检验。
2　结果
　　OMSCC癌巢及癌旁上皮中p53及C-erbB-2阳性表达率见附表。p53阳性表达在癌旁正常上皮中“散在”分布于基底层及深棘层,并随着异常增生的出现及加重,阳性细胞数量增加并向浅棘层弥散,在细胞增殖旺盛区域呈“灶性”分布;在癌巢中p53阳性表达与癌巢细胞分化程度有关,分化好者阳性细胞仅分布癌巢外周部分,而中央区阴性,分化差者,阳性细胞密集或散在分布于整个癌巢。C-erbB-2阳性表达在癌旁正常及异常增生上皮中均分布于棘层,而基底层、角化层阴性;在癌巢中,阳性细胞主要位于癌巢中央非角化区,角化珠阴性,而外周除2例部分阳性外,余均为阴性。统计学处理表明p53表达在癌旁正常上皮与异常增生上皮之间有显著性差异(P＜0.05);癌旁正常上皮与癌巢之间有高度显著性差异(P＜0.01);癌旁异常增生上皮与癌巢,鳞癌Ⅰ级与Ⅱ级癌巢之间无显著性差异(P＞0.05)。C-erbB-2表达程度在从正常上皮向异常增生及癌发展过程中,虽然有下降趋势,但在统计学上则无显著差异性(P＞0.05)。癌旁正常上皮、异常增生上皮、Ⅰ级鳞癌癌巢、Ⅱ级鳞癌癌巢中p53与C-erbB-2表达有一定的负相关性(r=-0.65)。

附表　口腔粘膜鳞状细胞癌及癌旁上皮中p53及C-erbB-2的表达
Tab. The expression of p53 and C-erbB-2 in squamous cell carcinomas of oral mucosa and epithelium adjacent to the tumors
 

标本	总例数	p53阳性		C-erbB-2阳性
		例数	%	例数	%
癌旁正常上皮	21	6	28.6	10	47.6
癌旁异常增生上皮	19	12	63.2	9	47.4
Ⅰ级鳞癌癌巢	17	12	70.6	6	35.3
Ⅱ级鳞癌癌巢	12	7	58.3	5	41.7

3　讨论
　　p53抑癌基因在正常细胞中调控细胞生长,抑制肿瘤表型的产生,当p53基因发生突变时,就丧失了抑癌功能,并促使细胞的恶性转化。正常情况下,野生型p53蛋白的半衰期短而不稳定,用免疫组化不易检测,而突变型p53蛋白的半衰期长,稳定性增加,用免疫组化方法易被检出。本组资料OMSCC癌巢中65.5% p53表达阳性,同其它文献报道相近［1，2］。这表明p53基因突变在OMSCC中起重要作用。但分析p53表达结果时,应注意到免疫反应阳性并不完全反映p53突变,因在微波恢复抗原的同时,可以降低野生型的p53检测阈值。市售的用于石蜡包埋组织切片的p53抗体,一般同时具有抗野生型和突变型的能力。因此一部分过表达的野生型p53也可能被检出,尤其可发生于长期受烟草和酒精刺激而组织学上表现正常的上皮［3］。本文癌旁正常上皮与异常增生上皮p53阳性表达率有显著差异,且阳性细胞的分布发生变化,癌旁正常上皮中“散在”分布的p53阳性细胞可能是野生型p53过表达,而异常增生上皮中“局灶”分布的p53阳性细胞则与p53基因的突变有很大的关系。因此,癌旁正常上皮和异常增生上皮虽然都存在p53阳性,但可能其本质不同。异常增生上皮在一定程度上已经具备了“癌变”的生物学状态。

责任编辑：姚红祥