〔摘要〕目的：了解癌周血管生成对颊癌局部浸润方式形成的影响和关系。方法：收集60例临床病例及病理资料，结合组织学和免疫组织化学手段，光镜下分类颊癌浸润方式并定量计数癌周微血管密度。结果：颊癌浸润生长方式主要有4种：波浪型、团块型、条索型和弥漫型。癌周血管形成与其密切相关，并直接影响颊癌浸润生长方式的形成，其中以条索型和弥漫型浸润生长血管生成最强烈，恶性程度最高，预后最差。结论：上述4种浸润方式均为颊癌局部生长的主要形式，其形成受癌周血管生成的直接影响，两者间有密切的相关关系。癌周血管生成对癌细胞恶性行为的表达及发展至关重要，两者相辅相成。
关键词　癌；肿瘤侵犯；新生血管化

　　恶性肿瘤浸润生长是其发生淋巴道及血道转移的前提，也是影响患者治疗效果和预后的重要因素。肿瘤血管生成是恶性细胞进一步增殖、生长、浸润及发生转移的条件。因此，肿瘤以什么样的方式浸润生长与其诱导血管形成密切相关。本文拟通过临床病理资料结合免疫组化定量方法研究颊癌浸润方式与血管生成之间的相互关系，为阐明颊癌局部生物学行为特点及针对肿瘤血管的抗癌治疗提供实验依据。

1　材料与方法
1.1　研究对象
　　收集1984～1988年间华西医科大学口腔医学院口腔颌面外科接受手术治疗(同时行颈清扫术)的60例颊粘膜鳞癌患者的标本，其中男性33例，女性27例，年龄37～72岁.所有病例均经病理检查证实为颊癌。详细记录患者年龄、性别、肿块大小、肿瘤病理分级及随访资料，全部病例术前未经过放疗和化疗。对肿瘤已扩展到邻近一个或一个以上解剖区者均不纳入。以正常成人(8例男性，19～31岁)颊部组织标本为对照。
1.2　研究方法
1.2.1　病理切片准备　所有标本均经体积分数为10%福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，HE染色和ABC酶标法染色。
1.2.2　免疫组织化学染色　一抗：鼠抗人Ⅷ因子相关抗原(F8-RA)，美国Dako公司产品，工作滴度1∶80。二抗：生物素化羊抗鼠IgG，美国Dako公司产品，工作滴度1∶200。
　　ABC复合物　美国Dako公司产品，工作滴度1∶200。
　　其它　体积分数为5%正常马血清，0.01 mol/L PBS(pH7.4)，0.5 g/L胰蛋白酶消化液(pH7.6)，DAB，二甲苯，酒精，苏木素等。
　　实验方法　ABC酶标法染色，染色过程中PBS代替一抗作阴性对照，人颌外动脉为阳性对照。
1.3　微血管计量
　　经ABC法染色后的切片，血管内皮被褐染。血管计数：任何与附近微血管、肿瘤细胞以及其它结缔组织成分明显分离的褐染的内皮细胞或内皮细胞簇均被认为是单个的微血管。在国产MIAS-200显微图像分析仪下测量癌周区域，低倍镜(40倍)下任意寻找3个区域，再分别于高倍镜(400倍)、面积为0.502 4 mm2下依顺序测量每个区域内的3个视野，共得出9个数据，取其平均值为每个标本的血管密度。对照颊部组织测量方法相同，得出正常参考值。1.4　浸润方式
　　综合Jakobsson〔1〕和Yamamoto〔2〕等对头颈部鳞癌浸润方式的研究结果，将颊癌局部浸润生长分为4种类型：波浪型、团块型、条索型及弥漫型。

2　结　果
2.1　组织学检查
　　光学显微镜观察所有标本均为颊粘膜鳞癌。经F8-RA免疫法染色的切片，内皮细胞胞浆阳性表达。阴性对照不显色，颌外动脉内皮细胞胞浆阳性表达，实验染色效果可靠。
2.2　颊癌浸润生长方式
　　组织学观察各标本切片，发现颊粘膜鳞癌局部浸润生长主要表现为4种类型，分别为：波浪型(I型)：推挤性生长，边界较清楚，浸润浅，厚度较小，多为外生型生长；团块型(Ⅱ型)：呈团、片或带状生长，浸润面积较大，浸润不深，多为溃疡型；条索型(Ⅲ型)：呈小团块或条索状生长，浸润深，厚度较大；弥漫型(Ⅳ型)：分散成单个细胞或巢状生长，浸润深，厚度大，弥散广泛。各种浸润方式见图1。

图1　颊癌浸润方式模式图

　　颊癌不同生长方式临床病理资料记录见表1。

责任编辑：姚红祥