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［摘要］目的:分析Ets-1 (E26 transformation-specific)在颌骨骨肉瘤的表达及意义。方法：采用免疫组织化学ABC法检测Ets-1蛋白在20例颌骨骨肉瘤和8例骨软骨瘤中的表达。结果：55%（11/ 20）的骨肉瘤中Ets-1呈阳性表达，阳性表达率在各病理学分型间无显著性差异（P>0.05），而转移组明显高于未转移组（P<0.05）；12.5%（1/ 8）的骨软骨瘤呈Ets-1阳性，与骨肉瘤相比有显著性差异（P< 0.05）。结论：Ets-1在颌骨骨肉瘤中过表达并与骨肉瘤的转移有关。
［关键词］Ets-1； 骨肉瘤； 免疫组织化学
Ets（E26 transformation-specific）转录调控因子家族在胚胎发育、组织成熟和指导时期特异性及组织特异性基因的表达过程中发挥重要作用［1］。Ets-1能够调节一系列与细胞外基质重建有关的基因的表达，如尿激酶型纤维蛋白溶酶原活化物（uPA）、基质金属蛋白酶（MMP）-1，-3，-9、整合素β-2等，而这些物质可降解细胞外基质，使细胞粘着性降低并易于游走，有利于肿瘤的浸润生长和转移。目前许多研究证实Ets-1与肿瘤的侵袭、复发和转移密切相关［2, 3］。骨肉瘤是最为常见的高度恶性骨肿瘤，生长迅速且转移早，预后较差。关于Ets-1 在骨肉瘤中表达的情况国内外尚未见报道。本实验用免疫组化方法观察Ets-1在颌骨骨肉瘤和骨软骨瘤中的表达，探讨其在骨肉瘤发生和发展中的作用及意义。
材料和方法
一、标本来源
20例颌骨骨肉瘤和8例骨软骨瘤标本取自第四军医大学口腔医院1991～1998年门诊及手术标本。所有标本均经10%的福尔马林固定、石蜡包埋，5μm厚连续切片2张，分别行HE染色（用于病理诊断证实）和Ets-1免疫组化染色。
二、主要材料
兔抗人Ets-1多克隆抗体（PcAb）为美国Santa Cruz 公司产品；免疫组化ABC试剂盒为美国Vector公司产品。
三、免疫组化染色方法
①切片脱蜡至水；②3％H2O2中孵育10 min；③切片浸入0.01 mol/ L枸橼酸钠缓冲液（pH 6.0）经微波处理10 min；④正常羊血清37℃孵育20 min；⑤滴加兔抗人Ets-1 PcAb，4℃过夜；⑥滴加生物素化的羊抗兔IgG，37℃温育30 min；⑦滴加ABC复合物，37℃温育30 min。上述各步之间均经PBS缓冲液（pH 7.4）充分振洗；⑧显色液（终浓度为0.05% DAB，0.03 % H2O2，用PBS新鲜配制）显色后用苏木精稍稍衬染、脱水、透明、封片。上述各步未加说明者，皆为室温条件。染色同时用PBS代替 Ets-1 PcAb作为阴性对照，已多次重复实验均证明为阳性的一例乳腺癌标本为阳性对照。
四、结果判定
采用网格测试法，每例选择10个高倍视野（×40，向同一方向移动切片，不重复，不重叠），按照Ets-1阳性细胞数占视野中总细胞数的百分比分为3级：无阳性着色或阳性细胞数<5%为阴性（-）；阳性细胞数在5～50%之间为阳性（+）；阳性细胞数>50%为强阳性（++）。
五、统计学分析
采用统计学软件SPSS 8.0 进行x2 检验。
结 果
一、Ets-1的表达
Ets-1的表达定位于胞核内，为棕黄色颗粒，呈局灶性或弥漫性分布（附图）。20例骨肉瘤中，Ets-1的表达率为55%（11/ 20）。8例骨软骨瘤中，Ets-1的表达率为12.5%（1/ 8）。骨肉瘤Ets-1的阳性表达率明显高于骨软骨瘤（P< 0.05，见表1）。
二、Ets-1的表达与颌骨骨肉瘤病理学分型的关系
20例颌骨骨肉瘤按照病理学分型包括骨母细胞型10例，软骨母细胞型8例，纤维母细胞型2例，Ets-1的阳性表达率分别为50%、62.5%和50%。统计学分析表明Ets-1的表达在各型间无显著性差异（P>0.05,见表1）。
附图 Ets-1在颌骨骨肉瘤中的表达 ABC法 苏木精衬染×132
表1 Ets-1在颌骨肉瘤和骨软骨瘤的表达
| 组别 |
例数
|
Ets-1的表达 |
阳性率
(%) |
| - |
+ |
++ |
| 骨肉瘤 |
20 |
9 |
7 |
4 |
55* |
| 骨母线胞型 |
10 |
5 |
3 |
2 |
50 |
| 软骨母细胞型 |
8 |
3 |
4 |
1 |
62.5** |
| 纤维母细胞型 |
2 |
1 |
0 |
1 |
50**# |
| 骨软骨瘤 |
8 |
7 |
1 |
0 |
12.5 |
责任编辑：姚红祥 |