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2 结 果
2.1 高效液相色谱测定结果
MTX分子量恒定，其极性结构在甲醇洗脱液中为恒定峰。MTX标准品在反相高效液相色谱仪上呈现恒定单峰型，样品出峰时间一致，为8.9 min〔4〕。
FM-MTX样品HPLC峰型及出峰时间与MTX标准品一致(图1)。稀释100倍的样品，以离心后过滤膜，在HPLC测得的峰高在HPLC MTX标准曲线上求得MTX含量为260 mg/L；从而证实FM-MTX样品原药中MTX含量为260 mg/L。
图1 FM-MTX HPLC峰型
2.2 FM-MTX中Fe3O4含量测定结果
取FM-MTX样品3份，每份在原子吸收光谱仪上测定3次，Fe元素含量为(47.97±0.52) mg/L，即Fe3O4平均含量为66.29 mg/L。
2.3 比重测定
采用比重瓶法检测出FM-MTX药物在25 ℃时的比重为982.2 g/L，较25 ℃时水的比重略轻(997 g/L)。这可能是由于表面活性剂及交联剂的应用降低了药物的沉降系数，导致比重下降。
2.4 沸点测定
利用蒸馏法测出FM-MTX及FM的沸点如表1所示。FM-MTX药物的沸点与介质水非常接近。
表1 FM-MTX沸点测定结果(℃)
| 受检物质 |
沸点 |
| FM-MTX |
99.82 |
| FM |
99.45 |
| 水 |
99.80 |
2.5 粒径分布
FM-MTX粒度分布均匀，粒径为0.4～1.0 μm，占88.61%(图2)。
图2 FM-MTX粒径分布
2.6 稳定性分析结果
在40 ℃ 75%RH条件下放置6个月，含量未见明显变化。药物粒径以库尔特计数仪测定，未见颗粒明显变大和粘结现象。FM-MTX在0～6个不同粒径百分比见表2。
3 讨 论
甲氨蝶呤磁性抗癌药FM-MTX由甲氨蝶呤通过中间载体与磁液进行化学交联制备而成。它集甲氨蝶呤的抗肿瘤药学特性和磁定位导向性于一体，是一种新型靶向抗癌药物。FM-MTX制成后，首先要对其各组成成份进行检测，包括MTX含量、白蛋白含量、Fe3O4含量；并对其理化性能及稳定进行测定。这是甲氨蝶呤磁性药物剂质量控制的重要特性参数。
表2 FM-MTX颗粒组成(%)
| 粒径(μm) |
时间 |
| 0月 |
3个月 |
6个月 |
| <0.2 |
0.61 |
0.87 |
0.94 |
| 0.2～0.4 |
4.50 |
2.32 |
2.56 |
| 0.4～0.6 |
20.46 |
21.56 |
20.47 |
| 0.6～0.8 |
32.88 |
34.42 |
34.20 |
| 0.8～1.0 |
35.27 |
36.87 |
35.17 |
| 1.0～1.2 |
4.81 |
3.80 |
4.62 |
| 1.2～1.4 |
1.47 |
0.16 |
1.95 |
甲氨蝶呤紫外光谱扫描显示，其盐酸溶液在244 nm、306 nm波长处有最大吸收，在234 nm、262 nm波长处有最小吸收。我们利用MTX的上述特性，分别进行了紫外分光光度计法测定，反相高效液相色谱法测定，结果以HPLC较佳，测得FM-MTX中MTX含量为260 mg/L。Fe3O4含量采用浓硝酸水解后其水溶液应用原子吸收光谱法测定铁离子的含量，再推算出Fe3O4的含量，并按分子量推算其克分子摩尔比。
常规的粒度分析方法有筛分法、沉降法、气隙法等。这些方法在分析粒子较大的颗粒样品是有效的，但对于颗粒粒度小于1 μm左右的试样，其分析结果不能令人满意。自然沉降法对粒度小于5 μm的样品，沉降已有困难，数据重复性很差，而气隙法得出的平均粒度则明显小于试样的实际粒度，颗粒越细其表面积越大，所引起的表面吸引力也越强。我们在X射线能谱仪的图像分析基础上，应用激光粒度分析仪对样品粒度百分比进行检测，给出粒径分布直方图，小于1 μm者占80%以上，达到满意的药用要求。
为了了解药物的元素组成，我们采用空间分辩力X射线能量色散谱(EDS)对FM-MTX进行了组成成份分析。根据不同元素电子跃迁前后的能级不同而得出特征性X射线波长，得到按能量展开的特征性X射线能量分析图，应用相应的软件处理这些能谱图，就可以进行谱峰的定性和定量分析。结果显示，FM-MTX的主成份以Fe,Na,Cl,O,C,S为主〔6〕。说明该药物基本可满足血管内给药的质控要求。
基金项目：国家自然科学基金资助项目 39070871
国家新药基金资助项目 93-(62)-N-42
责任编辑：姚红祥 |