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图4 线粒体肿胀明显，内摄磁性颗粒。线粒体膜裂解，内质网断裂。(TEM×10K)
图5 胞浆溶酶体内摄取大量磁性颗粒。(TEM×30K)
图6 胞浆溶酶体膜裂解，磁微粒释放于胞浆中。(TEM×40K)
图7 细胞外可见磁微粒。(TEM×20K)
3 讨 论
癌细胞的一个重要特征是不断增殖。对癌细胞增殖的抑制效果是鉴定癌细胞诱导分化的一个重要指标。本实验观察到磁导向甲氨蝶呤缓释药物FM-MTX100 μg/L对人口底癌HSC-2细胞生长有明显的抑制作用。药物作用48 h后瘤细胞生长明显抑制，并随着药物作用时间延长，对细胞生长的抑制作用增强。
超微结构观察到，HSC-2细胞经100 μg/L的FM-MTX药物处理后，多数细胞核呈椭圆形，部分核出现较规则的肾形，这说明100 μg/L的FM-MTX可使HSC-2细胞向单核细胞系分化〔5〕。药物作用后胞浆线粒体肿胀，缺嵴，内质网扩张、断裂，细胞连接结构减少，胞浆分泌小泡减少。说明100 μg/L的FM-MTX即可降低HSC-2细胞的分泌能力。Song等在对内质网进行系统研究发现，内质网为合成分泌性蛋白质和酶类的主要细胞器，与细胞的侵袭力密切相关〔6〕。我们观察到瘤细胞的内质网扩张、断裂、推断药物作用可减小细胞的侵袭能力。
我们通过药物作用后不同时间点的超微结构观察，明确了胞浆溶酶体为磁性微粒的摄取和代谢靶。药物作用1 h溶酶体大量增生；4 h后可见溶酶体内有吞噬的FM超微磁粒；24 h则见溶酶体明显增大，吞噬的FM颗粒增多；48 h溶酶体膜裂解，胞浆内可见磁微粒；72 h后磁微粒释放于胞浆外。其具体作用机理仍需进一步研究。
基金项目：国家自然科学基金资助项目 39070871
国家新药基金资助项目 93-(62)-N-42
作者单位：张皖清（第四军医大学口腔医学院，710032；现在304医院工作）
毛天球（第四军医大学口腔医学院，710032）
吴军正（第四军医大学口腔医学院，710032）
李焰（第四军医大学口腔医学院，710032）
参考文献：
［1］张皖清,毛天球,孙玉鹏,等.磁导向甲氨蝶呤缓释药物的研制及含量测定.实用口腔医学杂志，2000，16(1)：61
［2］张皖清,毛天球,吴军正,等.磁导向甲氨蝶呤缓释药物杀伤舌癌细胞的内在化过程.实用口腔医学杂，2000,16(1):58
［3］张皖清,马定祥,毛天球,等.磁微粒负载甲氨蝶呤对舌癌移植瘤的靶向治疗实验研究.实用口腔医学杂志,1990,6:147
［4］Wu JZ,Situ ZO,Wang W,et al.Chemosensitivity of salivary gland and oral cancer cell lines.Chin Med J,1992,105:1026
［5］Gonda MN.Ultrastructural studies of surface features of human normal and tumur cells in tissue cultrure by scanning and transmission electrom microscopy.J Natl Cancer Institute,1976,56:245
［6］Song J,Lee C,Lin CH,et al.Electrom microscopic studies of the endoplasmic reticulum in whole mount cultures cells fixed with potassium permangenate.J Struct Biol,1991,107:106
责任编辑：姚红祥 |