| 分组 |
PNA |
UEA |
SBA |
RCA |
| 对照组 |
+~++ |
-~++ |
+~++ |
+~++ |
| 8-MOP |
-~++ |
+ |
+ |
+~++ |
| ATRA |
-~++ |
+ |
+~++ |
+ |
| 8-MOP+ATRA |
-~++ |
+ |
-~+ |
+~++ |
表3 经8-MOP和ATRA处理后 四种凝集素阳性细胞百分率 |
| 分组 |
PNA |
UEA |
SBA |
RCA |
| 对照组 |
93% |
47% |
98% |
93% |
| 8-MOP |
30% |
96% |
92% |
71% |
| ATRA |
82% |
85% |
77% |
23% |
| 8-MOP+ATRA |
57% |
63% |
18% |
86% |
处理以后凝集素染色分别表现为:①PNA受体表达的变化:对照组表现为多数细胞为(+)染色,细胞膜染色为主,而小部分细胞为(++)染色,细胞膜及胞浆均染色,胞膜着色明显;ATRA组少数细胞为(++),细胞内有浓染小团,多数细胞为(+),胞浆内细小颗粒(图1)。②UEA受体表达的变化:对照组多数为阳性(+~++),轻度阳性的表现为胞浆内网状着色,较强染色的表现为片状着色;ATRA组均为阳性(+),核膜着色明显,部分细胞颗粒状着色,聚集成片(图2)。③SBA受体表达的变化:对照组均为阳性(+~++),细胞膜着色明显,胞浆内细小颗粒状染色或片状着色;ATRA组多数细胞(+),个别细胞(++),核膜着色,胞浆内细小颗粒状着色(图3)。④RCA受体表达的变化:对照组所有细胞均为阳性染色(+~++),(++)细胞多,呈片状着色,其余细胞胞浆内颗粒状染色;ATRA多数细胞(+),呈密网状染色,个别细胞片状染色(图4)。 讨 论
本研究发现PNA、UEA、SBA和RCA四种凝集素在Mc3细胞中均有一定的细胞阳性染色,并且阳性细胞的染色强度不完全一致,也发现阳性着色可分布于胞膜及胞浆。在经不同处理后,细胞的染色情况发生变化,总的趋势为阳性细胞数量减少或增加(P<0.05),染色强度减弱,但也有部分细胞着色增强,这些变化可能与细胞的分化程度有关。尤其有意义的是,PNA在正常涎腺细胞中均为阴性[4],而Mc3细胞为阳性,经过各种处理后,PNA着色强度减弱(P<0.05);而UEA在正常涎腺的检出率最高,但在Mc3细胞中UEA的检出率最低,经处理后,UEA检出率提高(P<0.05),所有这些变化可能提示肿瘤趋向于良性分化[11]。 细胞膜与细胞的增殖、分化及癌变后各种表型变化关系密切,因此不少学者企图通过对肿瘤细胞膜的研究找到肿瘤发生、形成和发展的规律,并从中发现逆转和根治肿瘤的方法,Wallach提出所谓“肿瘤就是细胞膜分子病”的假说[5]。近年来一些报道指出,肿瘤细胞表面复合糖类的变化与肿瘤细胞的转移能力有关[6,7]。维甲类化合物已被证明具有预防癌变的作用,其能提高肿瘤细胞表面糖基转移酶活力,促使细胞膜上的糖蛋白合成升高,因而使癌细胞的粘着性提高,使之不易脱落进入血循环,所以成为被用作预防癌细胞转移的有效药物[8]。凝集素是一类能与特异性糖基结合的蛋白质,同时所有生物膜都含有糖结合物,而细胞表面的糖类化合物在细胞之间相互识别起主要作用。Couch[9]检测了用维甲类物质处理小鼠KLN205鳞癌细胞后,其细胞凝集素受体的变化与实验性转移能力的关系,经处理以后,KLN205细胞多种凝集素受体表达增强,同时伴随实验性转移能力下降。但也有相反的结果报道,在对体外培养的小鼠前胃癌细胞的研究中表明,经维甲酸处理后,细胞表面三种凝集素受体含量明显减少,而体内实验证实同样伴随自发性转移能力的降低[10]。因此,经维甲酸处理以后细胞凝集素受体含量的变化(增强或减弱),在一定程度上反应了肿瘤细胞膜的改变,而这种改变确与肿瘤细胞的转移能力密切相关,如:正常结肠粘膜上皮几乎无PNA受体,而结肠癌时则呈阳性。 在粘液表皮样癌的凝集素受体染色研究中有不同观点:①杨连甲等在粘液表皮样癌的研究中发现WGA、PNA、RCA、conA和SBA均有不同程度的阳性染色[4]。高津发现相似的情况即PNA、UEA、SBA、WGA有不同程度的阳性染色[11];而司徒镇强等的研究却不完全相同,他们发现RCA、conA和WGA为阳性,而PNA、UEA、SBA和DBA为阴性[12]。现在还不能清楚地解释上面的不同观点,但可能与肿瘤的异质性有关系。②杨连甲等在研究中还发现分化差的小细胞凝集素阴性染色,而分化越好,凝集素染色越强[4]。高津等进一步指出,与正常组织细胞相比,肿瘤细胞表面凝集素受体的变化与肿瘤细胞恶性浸润性生长等生物学行为有关。③杨连甲、高津和司徒镇强均发现凝集素阳性染色可分布在胞膜及胞浆中,并提出阳性细胞的多少及分布的不同与细胞的分化程度有关。
责任编辑:姚红祥 |