【摘要】　目的　探讨口腔颌面部鳞癌对化疗药物耐药的机制。方法　采用单克隆抗体MRK16，检测了40例口腔颌面部鳞癌标本中的多药耐药基因产物P-糖蛋白。结果　鳞癌中P-糖蛋白表达率为62.5%，有化疗史组的P-糖蛋白水平显著高于未化疗组(P＜0.05)，分化较高组P-糖蛋白水平显著高于分化较低组(P＜0.05)。将P-糖蛋白表达与临床化疗疗效对照，P-糖蛋白预测化疗疗效的准确率为75%。结论　P-糖蛋白在口腔颌面部鳞癌多药耐药的机制中起重要作用。
　　【关键词】　抗药性，多药　　癌，鳞状细胞　　P糖蛋白

　　鳞癌在口腔颌面部恶性肿瘤中最为常见，约占80%以上。近年来多采用联合化疗，使鳞癌化疗的有效率有所提高，但仍不理想，且在不同个体中对相同化疗方案可表现出不同的敏感性。有研究表明，癌细胞对多种化学药物的耐药性(multidrug resistance, MDR)是化疗效果欠佳的一个重要原因，而产生MDR现象的主要机制是MDR基因的编码产物P-糖蛋白(P-glycoprotein, PGP)的过表达［1］。PGP是位于肿瘤细胞膜上具有转运功能的糖蛋白，它通过外排药物而降低肿瘤细胞内的药物浓度，从而使肿瘤细胞产生耐药。目前有关口腔颌面部MDR机制的研究很少，我们检测了40例口腔颌面部鳞癌的PGP表达，旨在探讨口腔颌面部鳞癌化疗敏感性的个体差异性的分子机制。

材料与方法

　　1.临床资料：选择浙江医科大学附属第一医院口腔科1992～1996年间收治的40例口腔颌面部鳞癌患者，其中男性22例，女性18例，男女之比为1.22∶1；年龄34～72岁，平均47.8岁。所有病例均经病理证实并分级，其中高分化26例，中分化8例，低分化6例。对24例初诊患者进行TNM分期，I期10例，II期6例，III期3例，IV期5例。40例患者中24例在确诊后先行化疗，16例先行手术治疗。

　　2.标本：标本来源为活检或手术切除的标本，实验中使用的单抗为MRK16(Tsuruo. T.Japan赠)，免疫组化试剂为过氧化物酶标记的链霉卵白素试剂盒(北京中山生物技术有限公司生产)。所有操作步骤均严格按药盒说明书进行。阴性对照组用PBS代替一抗，阳性对照组用人红白血病多药抗药细胞株K562/DOX(浙江医科大学肿瘤所建立)。所有切片均在Olympus光镜下观察，胞膜胞浆着棕黄色者为阳性。
　　3.疗效评价标准：化疗方案采用卡铂+平阳霉素+长春新碱。化疗疗效评价标准采用WHO制定的标准：CR：临床观察肿瘤消失或组织学检查未见癌细胞；PR：肿瘤体积缩小＞50%；NR：肿瘤体积缩小＜50%或无变化。CR与PR为有效。统计方法采用χ2检验。

结果

　　1.40例标本中PGP阳性25例，阴性15例，阳性率为62.5%。阳性细胞染色主要位于胞膜，也可位于胞浆，但核均无着色(图1)；阴性对照组均无着色，正常鳞状上皮处也未见着色。分析PGP表达与临床各因素关系发现：PGP表达与临床分期及淋巴结转移无相关关系，而有化疗史组PGP表达率显著高于初诊组(P＜0.05)，见表1。

表1　鳞癌患者PGP表达与化疗史的关系(例)

组别	PGP		总计
	阳性	阴性
初诊组	12	12	24
有化疗史组	13	3	16
总计	25	15	40

注：PGP为P-糖蛋白，下表同 　　2.高分化组PGP表达率显著高于中、低分化组(P＜0.05)(表2)。且同一张组织切片中分化程度不同的区域PGP表达不同，分化高处有PGP表达，分化低处未见PGP表达(图2)。将能观察到化疗疗效的24例患者PGP表达与疗效相对照，发现14例PGP(+)者其疗效为PR 4例，NR 10例；10例PGP(-)者其疗效为CR 2例，PR 6例，NR 2例，其预测化疗疗效的准确率为18/24(75%)。 表2　鳞癌患者PGP表达与肿瘤分化程度的关系(例)

讨论

　　多药耐药性是指肿瘤细胞在一种化疗药物的作用下，同时对几种结构和作用机制不同的化疗药物产生耐药性。MDR机制非常复杂，可能与PGP、拓扑异构酶、谷胱甘肽S转移酶、06-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶有关［2～4］。但目前研究证实，MDR基因产物PGP的过表达是产生MDR的主要机制，由于PGP可与化疗药物结合，通过ATP供给能量，将药物从胞内泵至胞外，降低瘤细胞内药物浓度，使之耐药，从而直接影响化疗效果。因此探讨口腔鳞癌的MDR机制，对于克服癌细胞的耐药性，提高口腔鳞癌的化疗敏感性至关重要。

责任编辑：姚红祥