图1 正常鼠牙周组织　1 牙周生周膜，2 牙根，3 筛状板（下同）HE×400

图2 术后12周时，冷冻牙一骨块愈合情况 HE×400

　　2.4　电镜观察

　　术后6周时扫描电镜观察,见两组标本牙周膜内胶原纤维均按一定方向有序排列,附着在牙骨质和筛状板上。在近牙骨质表面有成骨细胞。透射电镜观察见牙周膜有富含粗面内质网和发达高尔基复合体的成纤维细胞,和由有周期性横纹的胶原原纤维互相粘合而成的胶原纤维。

　　2.5　微血管造影观察

　　术后2周:骨膜处有粗大的血管伸向植骨间隙,发出细小分支向上进入牙-骨块。在根尖区可见由一条主血管发出很多细分支呈帽状沿牙周膜向上生长。血管从根尖孔进入根管;术后3～4周,牙周膜内血管增多,相互吻合成网;术后6～8周:血管网不断改建,牙周膜、根管内、牙槽骨内血管相互吻合。术后12周:牙周膜内血管数量减少,常见动静脉伴行。术后16～20周:可见近根尖区的牙槽骨内有与胫骨髓腔相连的血窦形成。

　　3　讨　　论

　　骨组织经冷冻外科处理后,发生无菌性坏死,当其植入机体后,源于受植床的间充质细胞分化为成骨细胞以冷冻骨作为成骨支架,在冷冻骨的骨形成蛋白诱导下生成新骨将移植骨替代［2］。本实验结果表明冷冻牙-骨块移植后,骨组织的愈合与文献报道一致。术后4周就可见新生的骨组织呈楔状向牙-骨块内生长。随着时间的推移新生骨完全替代再植牙-骨块中的骨质成分。新鲜牙-骨块在移植早期尚存部分存活的细胞,但在术后4周时,新鲜牙-骨块和冷冻牙-骨块愈合过程已无明显组织学差别。

　　牙-骨块经冷冻处理后,牙周膜变性坏死呈嗜伊红均质状染色,但随着血管的长入和血管周围间充质细胞分化,成纤维细胞在牙周膜内增多和广泛分布,使之与新鲜牙-骨块移植组标本比较,在组织学亦无明显差别,同时间充质细胞分化的成牙骨质细胞、成骨细胞分别分布在牙骨质和牙槽骨筛状板的表面,这种分布可阻止牙骨质的吸收,使新生的纤维得以固定埋入新生的牙骨质中。这表明牙-骨块移植后由受植区来源的间充质细胞的特定分化在牙周膜、牙骨质及骨质再生过程中起着重要作用［4］。在牙-骨块愈合过程中,可见根尖及根管内硬组织的吸收。

　　牙-骨块移植后,早期牙周膜内血管数较少,后期牙周膜内血管逐渐吻合成网,形成分布均匀且常常是动静脉伴行的血管网供应新生牙周膜的营养。由于胫骨周围有强大的肌肉群,在牙-骨块改建的后期,愈合牙-骨块牙槽骨筛状板的出芽生长以及在牙-骨块与胫骨结合区出现的血窦等,都可能是为适应这一特定环境而发生的改建。同时发现再生的牙周膜较正常牙周膜疏松,与无功能牙齿的牙周膜非常相似,但这种再生的牙周膜在给予正常的生理性刺激时能否改建适应咬合功能,还需进一步研究。

责任编辑：姚红祥