对照组GD1314～GD148舌体位置高，腭突在其两侧垂直生长(图4)；GD1414～GD158舌体下降，腭突上抬；GD1522～GD168两侧腭突完全接触融合，但与前腭突未完全融合遗留少许缝隙(图5)。
　　实验组GD1314～GD148舌体及腭突位置与对照组无差异，腭突在两侧垂直生长；GD1414～GD158舌体位置未下降，腭突仍位于舌的两边；GD1522～GD168腭突上抬，与舌体的位置一致，但两侧腭突未接触融合，遗留较大的裂隙(图6)。

讨　　论

　　维甲酸类物质(RA)是维生素A的衍生物。目前，因其明确的能诱导细胞分化作用而广泛应用于临床治疗皮肤病、白血病等症。维生素A的代谢产物有全反式维甲酸(ATRA)、3，4脱氢维甲酸(ddRA)等。这些活性物质在生物体的胚胎发育、器官形成、细胞分化和维持正常的生理稳态中起重要作用。80年代初期有人发现体外培养的未分化间充质细胞在加入RA后有向软骨细胞及成骨细胞分化的趋势［2］。目前证实它能抑制白血病细胞的增殖，促其向成熟的粒细胞分化，并能诱导骨髓干细胞向成熟的粒细胞、淋巴细胞分化［3］。RA广泛的生理作用是以RA受体(RAR、RXR)介导发挥的。这些存在于细胞核内的受体与特异性的RA区域结合调节邻近靶基因的表达，使细胞周期受阻于G0/G1期，抑制其增殖，促使细胞成熟分化［4］。
　　C57BL/6N系小鼠是一种近交系小鼠，受孕率低，国内尚未见到用它建立腭裂模型。应选用12周龄以后，体重25g以上的小鼠，因为C57BL小鼠在日龄70天以后才达到性、体完全发育成熟。因此，选择体壮、性完全成熟的小鼠，可提高受孕率。维甲酸浓度按80mg/kg与植物油混匀后的体积不超过0.2ml。既能避免胚胎死亡，又能保证仔鼠产生腭裂。
　　本实验结果可见，C57BL/6N系小鼠腭突的发生、形成及两侧相互融合，集中在GD13d～16d，其经历3个发育阶段，GD1314～GD148为腭突垂直生长期，GD1414～GD158是腭突上抬期，GD1522～GD168为腭突融合期，历时较短。从HE染色切片中看，这段时间是间充质细胞大量增殖而较少分化时期。密集的未分化间充质细胞形态小、细胞核形态各异、着色深。腭胚器官生长迅速，在短时间内体积膨大，在中线处与鼻中隔及对侧的腭突接触并融合。此时摄入大量外源性的RA，可能干扰了腭突间充质未分化细胞的正常增殖信号而抑制增殖，造成腭突发育瘦小，腭突上抬延迟，在腭突发育的最后时期不能到达中线与对侧的腭突融合，导致仔鼠发生腭裂。本实验结合扫描电镜更直观、更立体地观察了腭突正常发育及腭裂形成的过程，为保证维甲酸诱导的小鼠腭裂模型的建立提供了有效 的手段。

图1　对照组小鼠GD1314，腭突在舌体两侧垂直生长，舌体接近鼻中隔（HE×4）图2　对照组小鼠GD168，两侧腭突、鼻中隔相互融合，腭间质通（HE×4）图3　实验组小鼠CD168，两侧腭突、鼻中隔均未融全（HE×4）图4　对照组小鼠GD1314，腭突位于舌的两侧，舌体位置（SM×70）图5　对照组小鼠GD168，两侧腭突融合，与前腭突未完全融全（SM×70）图6　实验组小鼠CG168，两侧腭突仍分离于舌的两边，鼻中隔暴露（SM×70）

作者单位：李鑫（西安，第四军医大学口腔医院　710032）　
金岩（西安，第四军医大学口腔医院　710032）　
董绍忠（西安，第四军医大学口腔医院　710032）　
赵宇（西安，第四军医大学口腔医院　710032）　
朱萧玲（西安，第四军医大学口腔医院　710032）

参　考　文　献

1，Helms JA,Kim CH,Hu D,et al.Sonic hedgehog participates in craniofacial morphogenesis and is down-regulated by teratogenic doses of retinoic acid.Dev-Biol,1997，1:187(1):25.
2，Laininer EJ,Chen DT,Hoar RM,et al.Retinoic acid embryopathy.N Engl J Med,1985,313:837.
3，Agadir A,Cornic MJ,Jerome M,et al.Characterization of unciear retinoic acid binding activity in sensitive leukemic cell lines:cell specific uptade of ATRA and RAR alpha protein modulation.Biochem Biophys Res Commun,1995,213:112.

责任编辑：姚红祥