3　讨　论

　　HSPs是一类具有维持机体自身稳定功能的应激蛋白，热与多种刺激均可诱导其表达，特别是 HSP70在几乎所有生物的应激细胞中都经常高度地被诱导。NIH3T3细胞为成纤维细胞，而创 伤愈合中，修复细胞即以成纤维细胞为主，因此，用3T3细胞建立体外创伤模型能较好地模 拟创伤愈合过程。

　　Polla 〔4〕认为高于种属体温3～4 ℃时，短时间(通常为20 min)即可诱导HSPs的合 成。本实验用42 ℃处理3T3细胞20 min后即发现了HSP70表达。台盼兰排斥实验的结果表明 这种热刺激是非致死性的，可以用来诱导HSP70 的合成从而进行有关研究。

　　免疫细胞化学的研究表明，非热处理组3T3细胞在接种24 h及长成单层细胞时，HSP70的表达 很弱；而48 h时，HSP70在胞浆及胞核内均有表达，HSP70的这种表达变化可能与细胞的增殖 状态有关。如上所述，3T3细胞在接种24 h后贴壁、伸展，细胞生长不活跃；在长成单层细 胞时，细胞增殖基本停止；而在48 h时，细胞处于增殖活跃期。这说明在细胞增殖时，HSP7 0的合成增加。我们先前的研究也发现，在生长活跃的肉芽组织中HSP70呈现高表达，而在疤 痕化组织中基本不表达。

　　MTT比色实验表明，创伤后热处理组细胞增殖活性明显高于非热处理组。创伤的愈合有赖于 细胞的增殖及迁移，说明非致死性的热处理能促进创伤的愈合。实验中也发现在创伤裸区内 ，热处理组细胞数目明显多于非热处理组，这可能与细胞内高水平的HSP70有关。有实验发 现，静止期HeLa细胞经血清刺激进入增殖状态时，可诱导HSP70及其mRNA的表达，并且HSP70 在S期集中于核内〔5〕，表明其在某种水平上参与了细胞的增殖。近来有学者用可诱 导HSP70的药物作用于糖尿病大鼠的背部创面，结果发现创面愈合加速〔6〕，说明HS P70参与了创伤愈合过程。

　　研究发现，HSP70具有两个结构域，即ATP酶区和肽结合区〔7〕，借助ATP水解产生的 能量，HSP70可与其他蛋白相互作用，参与蛋白的合成、转运以及变性蛋白的复性等。HSP70 对细胞增殖的影响可能与其作用于增殖相关蛋白有关，如通过减少一些抑制性酶的合成或促 进抑制性蛋白与目标DNA分离等方式启动细胞增殖过程〔8〕。

　　尽管实验发现细胞增殖过程中有HSP70的表达，而且通过热处理诱导后细胞的增殖活性升高 并可因此促进创伤的愈合，但HSP70在细胞增殖及创伤愈合过程中的作用机制尚需近一步探 讨。

责任编辑：姚红祥