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〔摘要〕 目的：研究丹参对体外骨髓细胞培养中破骨细胞生成的作用。方法：采用小鼠长骨骨髓体外培养方法，通过检测抗酒石酸磷酸酶（TRACP）阳性细胞生成数，反映破骨细胞的生成情况。结果：1.0g/L丹参可明显抑制TRACP阳性细胞的生成，其生成数仅为对照组的29.8%；PGE2(10-7mol/L)及1.25(OH)2D3(10-8mol/L)产生明显的促进作用，与对照组比较，TRACP阳性细胞生成数分别增加了6.04和6.68倍；丹参还可明显抑制PGE2和1.25(OH)2D3的作用，混合培养组TRACP阳性细胞生成数仅仅是单纯加PGE2和1.25(OH)2D3组的35.2%和39.3%，特别是多核破骨细胞数大量减少。结论：丹参可抑制骨髓细胞体外培养中破骨样细胞的生成，主要抑制破骨母细胞向成熟破骨细胞的转化，而成骨细胞可能在其中发挥了作用。
Effects of Salvia Miltiorrhiza Bung on osteoclast-like cells formation in mouse bone marrow culture
Ding Yin, Shunichi Soma , Teruko Takano-Yamamoto, et al
Stomatological College, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032
〔Abstract〕Objective: To study the effects of Salvia Miltorrhiza Bung(SMB) on the differentiation of cultured bone marrow cells into osteoclast-like cells. Methods: Mouse bone marrow cells were cultured in α-MEM alone(the control) or exposed to (1.0 g/L) of SMB，10-7mol/L of PGE2, 10-8 mol/L of 1.25(OH)2D3, 10 g/L of SMB+ 10-7 mol/L of PGE2 or 1.0 g/L of SMB+10-8mol/L of 1.25(OH)2D3 for 8 days respectively. Tatrate-risistant acid phosphatase(TRACP) positive cells were detected with Burstone stainning method. Result: The number of TRACP positive cells in the group of SMB was 29.8% of that in the control and that in SMB+PGE2 or in 1.25(OH)2D3 were 35.2% or 39.3% of that in PGE2) or in 1.25(OH)2O3. TRACP positive cells in the group of 1.25(OH)2D3 and of PGE2 were 6.68 and 6.04 times as many as those in the control respectively.Conclusion: SMB has the inhibiting effects on the differentiation of bone marrow cells into osteoclast-like cells by direct or indirect action on osteoblasts that can synthesize and secrete stimulating factors for osteoclast differentiation.
Key words Salvia Miltiorrhiza; Bone marrow cells; Osteoclasts
丹参作为一种治疗冠心病的药物近年来也用于促进骨折愈合［1，2］，对丹参参与骨组织改建的机理也有一些研究。丹参除具有扩张微血管、降低血小板聚集和改善微循环的作用外，还有促进局部氧自由基清除，促进成骨样细胞分裂与增殖，增强成骨样细胞碱性磷酸酶活性和促进骨生成等作用［3～5］。但是，丹参对破骨细胞及骨吸收的作用仍不清楚。本研究通过小鼠骨髓细胞体外培养实验，观察丹参对破骨细胞的生成有何作用，进一步认识丹参在骨改建中的作用机理。
1 材料与方法
1.1实验材料 选用出生后7～9周小鼠（由日本静冈实验动物中心提供）；纯化丹参液由中国上海新冈制药厂提供；α－MEM培养液由美国西格玛公司提供；日本ICA生物制品公司提供胎牛血清（FCS）。
1.2骨髓细胞收集 颈椎脱臼法处死小鼠，置于体积分数(φ)为75%酒精中浸泡10min，无菌条件下解剖小鼠，取出四肢长骨，剔除附着之软组织，切除两端关节头，暴露骨髓腔，用注射器抽取磷酸缓冲液冲洗骨髓腔，收集骨髓冲洗液，混匀，计数备用。
1.3细胞培养 将骨髓细胞种于24孔培养板内（75×104个/孔），设对照组，丹参（1.0g/L）,PGE2（10-7mol/L）,1.25（OH）2D3（10-8mol/L）,丹参+PGE2,丹参+1.25（OH）2D3共6组，每组4孔。将细胞置于CO2孵箱内（37℃,φ5%CO2）,在φ含10%胎牛血清（FCS）的α－MEM培养液中进行培养，每两天更换培养液1次，根据设计在培养液中加入丹参，PGE2，1.25（OH）2D3等，8d后中止培养，进行细胞固定与计数。
责任编辑：韩晓炜 | 
