摘　要：目的　探讨聚乳酸(polylactic acid,PLA)膜复合脱钙冻干异体骨(demineralized freeze-dried bone,DFDB)修复下颌骨缺损的可行性，比较单纯PLA膜和PLA膜复合DFDB的骨修复能力。方法　在24只日本大耳白兔双侧下颌骨下缘中份形成1.0cm×0.6cm×0.4cm的矩形缺损。左侧缺损覆以PLA膜，右侧缺损植入DFDB后表面覆盖PLA膜。术后4、8、12周分期处死动物，取双侧下颌骨标本作大体观察，组织学观察，以及X线片计算机灰度值分析。结果　PLA膜复合DFDB侧成骨活跃，成骨量高，计算机灰度值分析表明，术后4、8周两侧缺损区内骨密度差异有显著性(P＜0.01)，复合材料侧骨密度较高。结论　PLA/DFDB复合材料是一种较理想的骨修复材料。

　　复合材料用于骨缺损修复，可以克服单一材料理化性能的不足，发挥协同作用，从而提高材料的骨修复能力^［1，2］。Andrregg^［3］和Harris等^［4］曾将脱钙冻干异体骨和引导组织再生(guided tissue regeneration,GTR)膜复合用于牙周硬组织缺损和种植体周围骨量不足的修复再生，结果发现脱钙冻干异体骨(DFDB)可以显著提高GTR膜的成骨效应。但Becker^［5］所做的类似研究则得出了相反的结论。这些研究都是针对牙周或种植体周围小面积骨缺损的修复再生。两者复合用于较大面积颌骨缺损是否可行，成骨效应如何，至今尚未见报道。本研究将可降解PLA膜和DFDB复合应用，试图对上述问题进行探索。

　　1　材料与方法

　　1.1　材料

　　(1) PLA膜：分子质量19kD、厚度200μm、孔径＜5μm。武汉工业大学生物材料研究所提供。

　　(2) DFDB的制备：取同种兔四肢长骨皮质骨，碾碎、洗净，25°C置入1∶1氯仿甲醇液脱脂0.5h，2°C 2mol/L CaCl₂ 1h，0.05mol/L乙二胺四乙酸1h，0.6mol/L HCL脱钙至透明，针刺无阻力，8mol/L氯化锂浸泡1h，55°C水4h，每次处理后用足量盐水漂洗10min，冻干，环氧乙烷消毒，等量分装无菌试管，常温密封保存。

　　1.2　实验方法

　　雄性日本大耳白兔18只(原湖北医科大学实验动物中心提供)，体重2.0～2.5kg，2%戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉，沿双侧下颌骨下缘切开皮肤、皮下、肌肉、骨膜、剥离骨膜，暴露下颌骨，于下颌骨中段用裂钻作1.0cm×0.6cm×0.4cm的矩形缺损，左侧缺损覆以PLA膜，右侧植入DFDB后表面覆盖PLA膜，分层缝合，术后预防性应用抗生素，每日两次，持续5日。

　　1.3　标本处理及指标观察

　　1.3.1　一般观察　术后4、8、12周各处死6只动物，取双侧下颌骨，去软组织，观察缺损愈合，新骨外形及质地。

　　1.3.2　X-ra6片计算机图像分析　在特定条件下(50kV,100mA,0.06s,50cm)拍取标本X-ray平片。用计算机图像处理系统(Deskscan扫描软件；photoshop图像分析软件，原武汉测绘科技大学图像图形实验室提供)获取各缺损区平均灰度值(代表该区骨密度高低)，用u检验对两侧骨密度均值作统计分析。

　　1.3.3　组织学观察　标本经10%中性福尔马林固定、冲洗、脱钙、脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋、矢状切成6μm薄片，常规HE染色，光镜观察。

　　2　结果

　　2.1　大体观察

　　所有动物伤口一期愈合，术后4、8周两侧缺损外PLA膜均完整，8周时变薄，12周质脆、有裂纹。各期均见薄层新骨沿PLA膜外表面生长，中间较薄，周边较厚，PLA侧较薄，新骨较少。PLA/DFDB侧较厚，面积较大。

　　术后4周去PLA膜，单纯PLA膜侧可见疏松的松质骨样新骨充填缺损，8周时新骨仍呈松质骨外观，结构相对致密(图1)，12周新骨外观更致密、质地、色泽似自体骨，PLA/DFDB侧，术后4周缺损区内见松质骨样新骨，8周时部分新骨似皮质骨，部分仍呈松质骨外观(图2)，12周时新骨质地致密如皮质骨。

　　2.2　组织学观察

　　2.2.1　PLA膜侧　术后4周缺损区内新骨结构稀疏，下缘骨小梁较粗大，中部小梁细小，近牙根部可见未钙化的骨样组织，小梁周围见少量成骨细胞，小梁间新生血管丰富，8周时下缘小梁融合成片状，部分标本可见较连续的皮质骨，与近远中自体骨大部分融合(图3)，中部小梁粗大，骨髓中可见脂肪细胞。14周时PLA膜内侧形成连续而致密的皮质骨，两端与自体骨完全融合，中部小梁吸收改建，结构稀疏，骨髓中可见大量脂肪细胞(图4)。

责任编辑：姚红祥