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摘要 目的:了解人与不同实验动物涎腺中肌上皮细胞的差异。方法:用HHF35对人和动物涎腺进行免疫组织化学染色，用计算机图像分析系统测量肌上皮细胞的平均体积比并进行比较。结果:人和动物涎腺中肌上皮细胞的平均体积比存在不同程度的差异。除啮齿类动物外，人和其它动物粘液腺中肌上皮细胞的平均体积比高于浆液腺中者。结论:涎腺肌上皮细胞的平均体积比与动物种类和涎腺分泌物性能有关。
关键词 实验动物 肌上皮细胞 免疫组织化学
肌上皮细胞（myoepithelial cells，MeCs）是动物多种外分泌腺（唾液腺、乳腺、泪腺、汗腺,等）的组织成分之一，它位于腺上皮和基底膜之间［1,2］。肌上皮细胞的功能目前尚不完全清楚，但是许多研究发现其胞浆内含相当多的肌动蛋白，因此一般认为它具有收缩功能，与腺体细胞的分泌有关［3,4］。光镜下，通过HE染色是不能区分肌上皮细胞的，需要利用酶组化、免疫组化等特殊染色方法来显示。HHF 35是近几年开始使用的识别特异性肌动蛋白（muscle-actin-specific）的单克隆抗体，作者使用它来区别肌上皮细胞和腺泡，希望通过定量测定比较肌上皮细胞的平均体积比，以了解不同动物涎腺中肌上皮细胞的发育是否存在物种间的差异及与分泌功能的关系。
1 材料和方法
1.1 实验对象
实验所用动物均取自华西医科大学动物中心。选正常成年昆明小白鼠、SD大白鼠、金黄地鼠、中国白兔、山羊、家猪、土种狗、猕猴各5只，雌雄不限，分别以断颈、放血方法处死，解剖出腮腺、颌下腺、舌下腺。小鼠、大鼠、金黄地鼠的腺体全部用于实验，其它动物则随机切取部分组织。另取成人（20～35岁）正常腮腺、颌下腺、舌下腺各5例。
1.2 免疫组化染色
使用特异性肌动蛋白HHF35单克隆抗体(DAKO公司，美国)和SP试剂盒(ZYMED公司,美国),用常规方法进行免疫组织化学染色，抗体浓度为1∶50。
1.3 形态计量方法
将所染切片在40倍物镜下用Mias-2000型图像分析系统（四川大学计算机系图像图形研究所开发）进行测试，每张切片随机选择10个视野，测量肌上皮细胞的平均体积比。所得结果均用±s表示,用t检验判断有无统计学差异。
2 结 果
2.1 形态学观察
HHF35免疫组化显示阳性的肌上皮细胞为棕黄色，镜下所见，肌上皮细胞呈薄的、连续或不连续的环状包绕在腺泡和闰管。在啮齿类动物的腺体中，肌上皮细胞较稀疏、较细、阳性信号也较淡。在人的腮腺中，除了在腺泡和闰管周围，少数纹管周围也可见肌上皮细胞。在家兔腮腺和小鼠颌下腺未见到肌上皮细胞的阳性信号。
2.2 定量组织学研究
通过图像分析仪测得各种动物和人的涎腺组织中肌上皮细胞的平均体积比(表1)。在腮腺中，猴、狗的肌上皮细胞明显多于人，而其它动物与人差别不明显；颌下腺中，猪、狗的肌上皮细胞多于人，金黄地鼠、大白鼠和兔的肌上皮细胞少于人，羊和猴与人相差不明显；舌下腺中，猪、狗、猴的肌上皮细胞与人的无明显差异，其它动物少于人。
表1 不同实验对象涎腺中肌上皮细胞平均体积比
| 实验对象 |
腮腺 |
颌下腺 |
舌下腺 |
| 金黄地鼠 |
1.86±0.28 |
1.67±0.32* |
2.17±0.38* |
| 小白鼠 |
1.72±0.21 |
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2.04±0.22* |
| 大白鼠 |
1.58±0.35 |
1.81±0.25* |
1.83±0.31* |
| 兔 |
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1.97±0.34* |
2.42±0.51* |
| 羊 |
2.26±0.19 |
3.13±0.56 |
3.02±0.39* |
| 猪 |
1.98±0.29 |
3.79±0.56* |
4.59±0.66 |
| 狗 |
3.51±0.47* |
4.36±0.37* |
3.48±0.52 |
| 猴 |
2.88±0.59* |
2.67±0.35 |
4.23±0.73 |
| 人 |
2.05±0.46 |
2.94±0.23 |
4.12±0.55 |
* 与人相比有统计学差异（P＜0.05）
3 讨 论
肌上皮细胞是一类兼有上皮和平滑肌特性的细胞［5,6］。位于涎腺腺泡和小导管周围，与上皮细胞构成双层结构，它与腺泡细胞、闰管细胞一样源于干细胞。电镜下观察，它位于基底膜上，通过桥粒附着在腺泡和导管上，胞浆内含有肌动蛋白和肌凝蛋白构成的肌丝。肌动蛋白收缩可帮助腺体排出分泌物。对肌上皮细胞进行研究的一个难点是在光镜下HE切片不能区分它，需借助于特殊染色。曾有多种组织学、酶组化染色用于此，但效果不理想。在用免疫组化染色时，抗体的选择很重要。有人用 CK14或者肌球蛋白识别肌上皮细胞，但 CK14缺乏特异性，它除了作用于人涎腺的肌上皮细胞外，还作用于导管的外周细胞，而且对不同动物涎腺的反应也不一致；抗肌球蛋白抗体只能用于冰冻组织，应用受到限制。作者使用特异性肌动蛋白抗体HHF35对人和动物涎腺肌上皮细胞进行染色，取得了良好效果，证明它是一种较适合于肌上皮细胞免疫组化染色的一种抗体，在动物组织中也有较广泛的交叉反应。多数研究发现肌上皮细胞位于腺泡和闰管周围，在腺泡外其形状为星形。由胞体向四周伸出多个突起包绕腺泡；在闰管外它呈梭形，长轴平行于导管。此外Chaudhry发现人腮腺中的肌上皮细胞可伸展到纹管，本实验证实了这点，在少数纹管外可见肌上皮细胞。
责任编辑：姚红祥 |