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在理论上报导基因表达水平与肌纤维摄取DNA量相关,本研究证实了这一点。共同注射两种质粒在同一肌纤维中发现了共同表达,同时也检测到各自分别表达的情况。启动子强度可根据X-gal染色的强弱来比较。本实验中人肌钙蛋白C快反应基因启动子强于CMV启动子。此外,本研究未发现报导基因在舌肌中的表达有性别倾向。 安全性是转基因的一个重要方面。根据Sou-thern杂交分析,作者未发现质粒DNA与舌肌细胞基因组发生整合。由于舌肌细胞是一种终末分化的细胞,不进行DNA复制,理论上整合机率很小。Southern杂交结果说明质粒DNA以游离形式存在于舌肌基因组DNA之外,这与Wolff等[6]报道相同。由此可见直接将质粒DNA注射到肌组织中是一种简便安全的方法,在基因治疗方面将会有应用前景。 有研究报道肌肉内直接注射编码特异抗原的重组基因可诱导体液和细胞免疫应答以防止动物再次受到该抗原的侵袭[7]。肌肉内反复注射流感病毒核蛋白基因不仅可诱导抗体反应而且可激活特异杀伤性T淋巴细胞[8]。Vito等[9]证明质粒编码的重组蛋白可由肌细胞分泌进入血循环,重组蛋白分泌长达45 d之久。舌是口腔鳞状细胞癌好发部位,阻止肿瘤生长和转移是舌癌治疗中一个重要问题。可以预见应用经过重新构建的质粒表达载体,如将TNF、IL-2、IL-4或其它细胞因子基因或抗肿瘤转移基因重组到表达载体中,从舌癌周围舌肌角度进行舌癌转基因治疗研究具有可行性。 舌肌为体内转基因研究提供了一个方便的位点,外源基因能在舌肌中表达使研究头颈部肌转基因成为可能。
责任编辑:姚红祥 |