三、结果分析：①取各种标准品、样品、零对照重复孔的OD平均值，然后将标准品、样品的 OD平均值减去零对照平均值，得出各标准品、样品的OD值。②绘制标准曲线：以X轴表示浓 度，Y轴表示OD值，将标准品的X值及Y值描绘在图上，取其直线部分，求出回归方程。③将 各样品的OD值代入回归方程，求出浓度值。④统计分析：除非另外说明，所有数值均采用均 数±标准差的表示方式；两组样本间比较采用学生组间比较t检验。

结　　果

　　一、临床资料：本研究的样品包括27例患者的31侧SF及4名健康志愿者的7侧SF， 计31例38侧关节SF。其中结构紊乱类12例(14侧)：包括可复性关节盘前移位8例(9侧)，年龄 21～58岁，平均33.25岁；不可复性关节盘前移位4例(5侧)，年龄17～45岁，平均26. 25岁。X线片显示，所有结构紊乱类均无骨质改变。骨关节病类15例(17侧)：单纯关节盘 穿孔者2例(3侧)，年龄分别为59岁、21岁，无骨质破坏；有明确OA改变者13例(14侧)，年龄 21～55岁，平均38岁，其中伴有关节盘穿孔者3例(3侧)；伴有结构紊乱者10例(11侧)。4名 健康志愿者无任何颞下颌关节病史，双侧关节无任何临床症状及体征，无风湿、类风湿及其 他系统疾病史，关系正常，面部发育基本对称。
　　二、IL-1ra和IL-10的浓度测量结果
　　滑液中IL-1ra水平：表1、表2及图1显示了IL-1ra的平均水平和分布情况。健康志愿者的滑 液中不能检测到IL-1ra的存在，TMD患者的关节液中IL-1ra的平均水平为182.40±55. 83pg/ml(表1和表2)。表1显示TMD患者关节液的IL-1ra水平与健康志愿者滑液中IL-1ra水 平之间的差异具有显著性(P＜0.01)。表2和图1示TMJ结构紊乱患者的IL-1ra水平为 175.78±52.43pg/ml(n=14)，TMJ骨关节病患者的IL-1ra水平为187.85±59. 51pg/ml(n=17)；两者的差异不具有显著性(P＞0.05)。
　　滑液中IL-10水平：健康志愿者和TMD患者的滑液中均未能检测到IL-10的存在。

表1　TMD患者和健康志愿者滑液中IL-1ra的浓度
 

	n	均数(pg/ml)	标准差
TMD*	31	182.40	55.83
健康志愿者	7	UD

*　P＜0.01相对于健康志愿者；UD，未检测出 表2　TMJ ID和OA滑液中IL-1ra浓度

　*　P＞0.05相对于ID

图1　TMJ结构紊乱和骨关节病患者滑液中IL-1ra的浓度
　　TMJ结构紊乱和骨关节病患者滑液中IL-1ra的浓度是用Sandwich-ELISA测定的。△，表示TMJ ID患者的IL-1ra水平；○，表示TMJ OA患者的IL-1ra水平。二者水平之间的差异无显著性( P＞0.05)

讨　　论

　　本研究首次采用了高敏感度、高特异性的夹心法酶联免疫吸附测定技术对颞下颌 关节紊乱病患者滑液中的IL-1ra和IL-10表达情况进行了检测。结果表明，IL-1ra在颞下颌 关节病患者滑液中有一定程度的表达，为182.40±55.83pg/ml；未能检测到IL-10 的存在。Malyak等曾经报道［4］，骨关节病患者大关节的11侧关节液中未能检测到I L-1ra的存在。这与本文检测结果不同，可能与我们所使用的试剂盒的检测敏感度(22pg/ml) 远较Malyak等人(500pg/ml)的为高有关。此外，颞下颌关节与大关节是否有所不同，尚不明 确。
　　正常情况下，为诱导IL-1介导的反应，仅需要不足5%的IL-1受体激活即可。然而，在体内和 体外，IL-1ra需高出IL-1 10倍-500倍才能抑制IL-1活性的50%［7］。持续性炎症可 导致包括IL-1在内的多种促炎细胞因子的上调，因而必须增加IL-1ra的量方能抑制炎症反应 。已有报道在体内IL-1ra需高出IL-1 100倍-10000倍时才能阻滞IL-1活性［8］。IL- 1ra若与滑膜上的IL-1受体结合，不仅需要和可溶形式的IL-1相竞争，而且需要和膜结合形 式的IL-1α相竞争。由于膜结合形式的IL-1α比可溶形式的IL-1更难降解，这就更加削弱了 IL-1ra的抑制性活性［8，9］。因此，即使是我们检测出了一定水平的IL-1ra，结合 Kubota等人所测量的IL-1β的结果［10］，在TMJ OA和TMD滑液中，IL-1ra与IL-1β 的比值分别为0.07和0.13，如果再加上未检测的IL-1α浓度值，这将远低于在体内 需要完全阻滞IL-1生物学活性的高达100-10000倍于IL-1的IL-1ra生物学剂量。

责任编辑：姚红祥