摘　要：目的　观察鼠三叉神经节中神经肽P物质、降钙素基因相关肽及神经肽Y阳性神经元的分布与密度，为今后研究神经肽在口腔颌面部的作用提供形态学依据。方法　SD雄性大白鼠8只，灌注固定，取双侧三叉神经节水平位连续切片，ABC法漂染，镜检，计算机图像分析。结果　三叉神经节中有丰富而均匀分布的P物质及降钙素基因相关肽阳性胞体，分别占神经元总数的15％和40％左右，染色深浅不一，主要为中小型假单极细胞，其阳性纤维聚集成束，远心端加入上、下颌神经及眼神经，近心端通向中枢神系统，但三叉神经节中无神经肽Y阳性胞体，只有散在阳性纤维分布。结论　三叉神经节中有丰富的P物质和降钙素基因相关肽神经元，但无神经肽Y神经元。
关键词：P物质　　降钙素基因相关肽　　神经肽Y　　神经元　　三叉神经节

　　为了解口腔颌面部神经肽(尤其感觉神经肽)的合成与分泌情况，我们对三叉神经节中感觉神经肽P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)和交感神经来源的神经肽Y(NPY)的分布与密度进行研究。

材料和方法

　　1.动物：SD雄性大鼠8只，鼠龄4周，体重180g～220g。
　　2.试剂与仪器：兔抗鼠SP血清(-抗)和合成鼠SP纯品(美国Serotec公司)，兔抗鼠CGRP血清(一抗)和合成鼠CGRP纯品(新西兰Watpa公司)，兔抗鼠NPY血清(一抗)和合成鼠NPY纯品(美国Serotec公司)，生物素化羊抗兔血清(二抗)和ABC复合物(美国Sigma公司)，四盐酸3.3-二氨基联苯胺(DAB)及葡萄糖氧化酶(美国Sigma公司)，恒冷切片机(美国Bright公司)，计算机图像分析系统(德国Leica公司)。
　　3.标本制备及染色：经鼠腹膜下注射1％戊巴比妥钠1ml，待麻醉满意后经心脏插管，4℃生理盐水快速冲洗后，用含4％多聚甲醛和0.2％苦味酸的固定液600ml先快后慢灌注固定3小时，取双侧TrG,置于20％蔗糖液中脱水24小时，取出标本用恒冷切片机行水平位连续切片，片厚40μm，分为4组：SP组、CGRP组、NPY组和对照组，采用ABC法漂染，DAB+葡萄糖氧化酶+氯化胺呈色。每TrG取中位切片一张中性红复染2分钟。
　　4.对照试验：①空白对照：用0.01mol/L PBS(PH7.4)取代一抗；②血清对照：用正常兔血清取代一抗；③吸收对照：分别用合成鼠SP、CGRP、NPY纯品1.0nmol/ml加入相应的稀释一抗中，置4℃湿盒中48小时后离心，取上清液取代各自的一抗，分别加入。其余步骤同实验组。
　　5.光镜下观察、摄像，计算机图像分析系统分析每组TrG中阳性胞体与纤维的密度。

结　　果

　　1.CGRP：TrG由上、下颌突和眼突组成，镜下观察表明棕黑色假单极CGRP阳性胞体均匀分布于三突中，直径从8μm至40μm不等，数目占全部神经元的40％左右，主要为中小型细胞，其中中型细胞约占45％，小型细胞占55％;阳性胞体染色深浅不一，部分细胞中心部位着色浅或不着色，周围胞浆点状着色，似菊花样，部分细胞胞浆内染色致密均匀，只在中心部位略淡，胞体染色深浅与胞体大小无关(图一)。TrG中有丰富的CGRP阳性纤维直径0.35～0.70μm；阳性纤维近胞体处，尤其发自染色致密的神经元时呈均质的腊肠状，而在胞体较远处或从染色淡的胞体发出的纤维则呈明显的扩张状态，纤维内串珠状膨体清晰可见；各突的阳性纤维聚集成束，远心端加入上、下颌神经及眼神经，分布于外周组织，近心端通向中枢神经系统。

图1　鼠TrG下颌突中有丰富的CGRP阳性胞体及纤维(ABC×20)

　　2.SP组：镜下观察表明SP阳性胞体为棕黑色假单极细胞，它们不甚均匀地分布于三突中，细胞数目少于CGRP阳性细胞，约占神经元总数的15～20％，主要为中小型细胞，直径从8μm至40μm不等，其中小型细胞占80％以上，中型细胞占20％以下，胞体染色普遍较深，约45％呈菊花样点状着色，55％呈致密均匀着色(图二)。TrG中有串珠状的阳性纤维散在分布，直径0.35～0．65μm，走行较直，逐渐聚集成束，远心端加入上、下颌神经和眼神经，近心端通向中枢神经系统。

责任编辑：姚红祥