3.2　牙菌斑与钛种植材料表面菌斑的形成

　　体内牙菌斑的成熟有一定的时间规律性^〔6〕，最初粘附于牙面的多是G⁺球菌，2 d时菌斑仍以球菌为主，3 d后菌斑中丝、杆菌含量增高，排列方式亦由疏松无序趋于紧密有序。一般7～14d方可形成含基底层、中间层和外层三层基本结构的成熟菌斑。本研究正是选择了2、7、14 d这几个菌斑形成过程中较关键的时间点进行观察，以动态考察种植材料表面菌斑的形成情况，也便于与体内牙菌斑比较。

　　扫描电镜观察单一或混合培养环境中孵育后试件表面，发现材料表面粘附细菌的凝聚现象(coaggregation)随着培养时间的延长而趋显著。由于体外培养环境与体内环境的差异以及种植材料表面物化特性与牙体组织的显著不同，不难理解钛种植材料表面菌斑形成的时间规律性与牙菌斑有所不同，例如培养2 d时材料表面就同时有球、杆菌粘附，然而凝聚现象^〔7〕作为不同类型细菌表面分子间相互识别的结果，则是任何基质表面菌斑形成所必需的。通常介导细菌间凝聚的多系植物凝集素样成分和碳氢化合物的相互作用，早期定植菌如链球菌、放线菌间的相互凝聚，而晚期定植菌如放线杆菌，卟啉单胞菌等的相互凝聚，但早期定植菌不识别晚期定植菌，成为这两组细菌的粘结桥。因此它无论在健康或病变部位均是优势菌，而且细菌凝聚的外形也凝聚菌间的含量比例有一定关系。Kolenbrander等的研究结果发现F.n与P.g以等比例混合时凝聚最强；以1∶80混合时，P.g沿F.n长轴排列成玉米棒状；以1∶10混合时，P.g与F.n形成网状结构样凝聚，其中存在玉米棒样结构，这与本研究中所观察到的情况有相似之处，但因混合比例上的不同，造成了细菌凝聚形态上亦有一定差异。由于菌斑是微生物定植的基本结构，菌斑积滞是局部软、硬组织健康的危险因素之一，因此对于细菌间凝聚机制及抑制方式的深入探讨，可望成为菌斑控制的另一途径 。

　　3.3　关于本研究混合菌液中各组成菌混合比例的选择

　　不同微生物对于生长环境的适应能力及营养要求不尽相同，混合培养条件下各组成菌之间可能存在竞争或拮抗等相互作用，因此在相同培养环境、培养条件下不同微生物的生长情况差异很大，通过研究作者发现本实验条件下相同环境中的混合菌各组成菌构成比在短期内(2 d)即发生显著变化，S.s的生长量远高于F.n及P.g(P＜0.02)。多次预实验结果 证明本研究条件下采用天然口腔菌群构成比或各菌等比例混合都无法在较长实验程期(7 d或14 d)内，保证各组成菌的存留，难以连续动态地观察到各菌生长粘附特点。同时却发现采用S.s、F.n：P.g=2∶3∶4的比例混合各菌时，有意识提高生长能力相对较弱的P.g及F.n在其中的比例，以期弥补其在本实验条件下与S.s在生长能力上的差异，能够保证整个实验程期内始终有足够达到可检出浓度的3种组成菌存在，更有利于观察其彼此间相互关系受到实验暴露因素影响与否。

责任编辑：姚红祥