实验还表明PCNA可以同时存在于软骨细胞S期和非S期，用免疫组化方法均能显示出来，所不同的是免疫反应强度和反应颗粒位置有所不同，提示在这种情况下用PCNA免疫组化方法观察细胞增殖情况应慎重[12]。Baserga[9]等认为在光镜下无法确切区分S期和非S期PCNA阳性细胞，在非S期细胞PCNA保存良好的情况下用它的免疫反应结果来表示细胞增殖是不适宜的。我们的实验结果也发现除一些典型的软骨细胞可以清楚区分开S期和非S期PCNA阳性细胞外，多数细胞并不能十分明显区别。
　　实验过程如标本的固定、免疫染色对PCNA的显示影响较大[13]。许多实验室都在努力寻找用免
　　疫法，其中最重要的一种手段是用微波进行抗原修复。从本实验对PCNA的显示情况来看，我们探索骨组织适当的固定方法和微波处理恢复抗原是十分成功的。然而由于很好地保持细胞的PCNA蛋白并能清楚显示出来而无法区别二种阳性细胞。因此，观察TGF－β对软骨细胞增殖作用时，在PCNA抗原保持和显示良好的情况下，将PCNA作为S期特异性标记物对细胞增殖进行判断是不全面的，用五溴尿嘧啶核苷对增殖细胞进行标记可以避免这一缺陷[14，15]。

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