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【摘要】羟基聚磷酸钙钠(HPA)是一种新型无机高分子材料,它具有与骨组织进行能量与物质交换的能力,用于骨组织缺损的修复。目的:考察HPA植入骨组织后其界面形成情况。方法:采用鼠胫骨内植入HPA,光镜下考察其组织反应情况,并与羟基磷灰石(HA)和钛合金(Ti6Al4V)引起的组织反应相比较。结果:发现不同种类的生物材料直接影响界面区早期的组织反应,HPA比其它材料较早地引导了新骨形成,结论:HPA一种理想的骨组织替代材料。
骨组织缺损的修复是临床面临的重要课题之一,如何尽快引导材料周围骨组织的再生,是解决这类问题的关键。羟基聚磷酸钙钠是一种新型无机高分子材料,它具有与骨组织进行能量与物质交换的能力[1]。本实验以SD雄性大鼠胫骨作为动物模型,考察其引导界面区骨组织再生的性能。
1材料和方法
1.1实验材料 羟基聚磷酸钙钠(HPA,中国科学院有机化学研究所提供),羟基磷灰石(HA,华西医科大学口腔生物材料研究室提供),钛合金(Ti-6A-l4V,宝鸡有色金属研究所提供)。材料尺寸为直径2mm,长度3mm,使用前,用双蒸馏水浸泡,超声波振荡清洗3次,100℃烘干,高压湿热灭菌备用。 雄性SD大鼠,体重250~300g(华西医科大学动物实验中心提供)。 1.2实验方法 随机将大鼠分为4组,每组2只,用戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔内注射全麻,术区加2%利多卡因局麻,于双侧胫骨中份,用电机裂钻低速钻孔,直径约2mm,深度进入骨髓,制备时使用大量生理盐水降温,尽量使孔径与材料密合。,三种材料,每只大鼠一侧植入两种材料,另侧植入一种材料和设空白对照。分别于术后第3天,7天,14天,28天断头处死动物,用金刚沙片在慢速低温条件下分离样本,并立即用4%的多聚甲醛4℃固定样本24小时,0.5mol/LEDTA脱钙10天,每天换1次脱钙液。小心取出材料,酒精梯度脱水。常规石蜡包埋,切片,HE染色,进行组织学观察。

图1 3天HPA,界面上见大量类骨质和骨小梁生成, 有细胞层将材料与新生类骨质分开(HE×200)

图2 术后3天见以成纤维细胞为主纤维排列环绕 钛合金,(HE×200)

图3 3天HPA,界面上见1~2层立方状细胞或 无定形类骨质,(HE×200)

图4 1周HA周围见2~3层细胞存在,呈梭形见 几层细胞与相邻类骨质分离,可能与制片过 程中界面被破坏有关,(HE×200)
2实验结果
术后3天,组织反应以炎性反应为主,见骨髓腔面出现大量中性白细胞,也见骨髓细胞。此期最突出的特点是HPA所引起的组织反应与羟基磷灰石不同,短时间内即可见到大量类骨质和骨小粱生成(图1),界面上有细胞层将材料与新生类骨质分开。新生的骨小梁疏松,排列紊乱,边缘有排列成行的成骨细胞,在邻近髓腔处明显可见分化的成骨细胞与类骨质融合,为典型的膜内成骨。HPA界面上也存在无骨小梁的区域,只有突出的炎性细胞。相邻髓腔内,可见散在异物巨细胞,多核、体大。HPA界面上大部分细胞胞核大,成三角形、卵圆形,已表现出成骨细胞的特征。但整个排列趋势是界面区细胞长轴平行于植入材料表面,其间可见少量梭形细长的成纤维细胞,界面上可见少量嗜酸性巨细胞。HA界面上细胞排列紊乱,胞核大,虽然形态上也是以成骨细胞的特征为主,但未见类骨质,也见少量成纤维细胞。钛合金组(图2)和对照组,以成纤维细胞为主,纤维环绕钛合金。 术后1周,HPA,HA两种材料周围均见大量类骨质,芽状骨和骨小梁,但仍有不少炎性细胞,周围新生类骨质较致密,骨陷窝内及骨小梁边缘细胞核较小,呈分化成熟特征,可见个别破骨细胞,少见巨噬细胞。骨小梁相互连接成网状,有骨髓结构出现。HPA周围有两种情况存在,一种是界面上有1~2层细胞,但细胞不呈梭形,而近似立方状,核稍大;另一种界面上未见细胞,材料与无定形类骨质直接接触(图3)。HA周围见2~3层细胞存在,此处的细胞成梭形,与材料表面平行且可见几层细胞与相邻类骨质分离的现象,这可能与制片过程中界面被破坏有关(图4)。钛合金周围见大量新生类骨质,见软骨内成骨和膜内成骨,界面上存在2~3层细胞(图5)。对照组,在缺损处,结缔组织增生,排列紊乱,有骨化生的趋势,见少量类骨质,髓腔面仍有少量炎性细胞。
责任编辑:姚红祥 |