[摘要] 目的 探讨转化生长因子—B受体Ⅰ、Ⅱ(TGF-BRI、Ⅱ)在人年轻恒牙牙本质—牙髓复合体中的表达及其生物学作用。方法 应用免疫组化方法检测TGF-BR I、Ⅱ在人年轻恒牙牙本质—牙髓复合体中的表达。结果 TGF-BR I、Ⅱ在年轻恒牙牙本质—牙髓复合体中的表达呈现空间分布特异性，在成牙本质细胞中呈强阳性表达，其他牙髓细胞呈弱阳性表达。结论 TGF-BRⅠ、Ⅱ在年轻恒牙牙本质—牙髓复合体的修复过程中发挥重要作用。
[关键词] 转化生长因子—B；受体；牙本质—牙髓复合体
转化生长因子－B(transforming growth factor,TGF-B)是一族具有多种生物学功能的细胞因子，对细胞的形态发生、增殖和分化过程起着重要作用，有利于胚胎发育和细胞修复，参与牙胚的发生、发展、成熟以及牙体组织的修复过程「1」。TGF--B功能的发挥通过细胞表面的特异性受体介导。转化生长因子受体(TGF-BR)包括TGF-BRⅠ、Ⅱ、Ⅲ型3种形式。TGF-pRI、Ⅱ参与了牙胚的发育及成牙本质细胞、成釉细胞的分化。TGF-BRⅠ、Ⅱ在鼠、牛以及人第三磨牙牙髓细胞、成牙本质细胞的表达均有报道「2,3」。本研究应用免疫组化方法检测人年轻恒牙牙本质—牙髓复合体中TGF-BRI、Ⅱ的表达，并探讨其在牙本质—牙髓复合体修复过程中的生物学作用。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 制作石蜡组织切片 取正常新鲜离体前磨牙(正畸拔除)40颗，根尖孔未发育完成，年龄在12～13岁。牙齿离体后立即纵剖，置10％甲醛中性缓冲液内室温下固定24 h。15％EDTA脱钙液4℃脱钙6—8周。脱水、透明、浸蜡、4 um厚度石蜡组织切片。
1．1．2 TGF-BRⅠ、Ⅱ免疫组化染色 主要试剂：TGF-BR Ⅰ、Ⅱ型兔IgC多克隆抗体(Santa CruzBiotechnology，Inc北京中山生物技术有限公司代理)；ABC试剂盒，DAB显色试剂盒(北京中山公司)。
1．2 方法
采用ABC法：石蜡组织块4 um切片，切片脱蜡至水，3％H202室温孵育10min，1％胰蛋白酶消化，PBS漂洗3次，加第一抗体(4℃过夜)，PBS漂洗3次，加生物素化第二抗体(37℃孵育1 h)，PBS漂洗3次，DAB溶液显色(室温10—15min)，阳性对照为乳腺癌组织，阴性对照用PBS代替一抗。苏木素复染，脱水透明，封片观察。
染色结果判断标准：阳性信号为胞质和胞膜出现黄色着色。棕黄色为强阳性，黄色为阳性，浅黄色为弱阳性，未染色为阴性。
2 结 果
TGF-BR Ⅰ、Ⅱ型的染色结果相似。TGF-BRⅠ、Ⅱ型在细胞结构中的分布：阳性染色位于细胞膜和细胞质，细胞核内无阳性染色；在牙本质—牙髓复合体中的空间分布特点：位于牙髓牙本质交界处的成牙本质细胞层呈强阳性染色，其他牙髓组织细胞呈弱阳性染色，部分切片示牙髓成纤维细胞为阴性染色，在前期牙本质及牙本质内呈阴性染色(图1、2)。
牙髓成纤维细胞(PF)呈弱阳性，成牙本质细胞(Od)呈阳性，牙本质(De)呈阴性
图1 TGF-BR I在人年轻恒牙牙本质—牙髓复合体中的表达(ABC法x400)
牙髓成纤维细胞(PF)呈弱阳性，成牙本质细胞(Od)呈强阳性，牙本质(De)呈阴性
图2 TGF-BR Ⅱ在人年轻恒牙牙本质—牙髓复合体中的表达(ABC法x 200)
3 讨 论
年轻恒牙的生长发育机制和治疗一直是临床研究的一项重要内容「4」。TGF-B家族主要包括TGF-BI、TGF-BⅡ、TGF-BⅢ以及骨形成蛋白(BMP)。它们通过促进细胞外基质(ECM)如胶原蛋白、纤维黏连蛋白的表达和抑制ECM的降解，参与胚胎发育和细胞修复。TGF-BR是TGF-B发挥生物学功能的载体。
近年来，许多研究表明TGF-B和TGF-BR在牙胚的发生、发展和成熟过程中对细胞的分化、胞外基质的形成等发挥重要作用。TGF-B在牙齿形成过程中通过旁分泌和自分泌机制发挥作用「5」。它们在牙本质—牙髓复合体中的表达及生物学作用也越来越引起重视。
