炎症人牙髓组织渗出液中IL-8含量的检测

2007-5-21 17:05  来源:牙体牙髓牙周病学杂志
作者:郭希民 阅读量:1302

  【摘 要】  目的:检测人正常和炎症牙髓组织渗出 液中IL-8的含量,揭示IL-8与牙髓炎的关系。方法:用滤纸条浸润法 采集正常和临床诊断为急性或慢性牙髓炎患牙牙髓组织渗出液。用ELISA方法检测其IL-8含 量。结果:正常牙髓组织渗出液中检测不到IL-8,而炎症牙髓组织渗出 液中均有较高水平的IL-8(0.33~1.0μg/L),且在急性牙髓炎中的水平高于慢性牙髓炎 (P<0.01)。结论:IL-8参与了牙髓炎的发生和发展,是牙髓炎症反应中的重要 细胞因子。
  【关键词】 IL-8; 牙髓; 渗出液; 牙髓炎

  牙髓炎多继发于龋病,是一种以G-厌氧菌感染为主的炎症性疾病。 细 菌在直接侵害组织的同时,还释放各种毒性产物,如内毒素脂多糖(LPS)等激发机体免疫 系 统,产生多种细胞因子,参与免疫反应,造成免疫损伤。这些主要参与炎症反应的细胞因子 可以统称为炎症性细胞因子,包括IL-1β、IL-1α、IL-6、TNF-α、IL-8等[1], 对这些因子的深入研究有助于揭示炎症反应的内在机制,并成为近年来炎症研究的热点。
  IL-8是由激活的外周血单核细胞中分离到的一种趋化蛋白[2],对中性粒细胞(PMN )有显著的趋化活性,同时也是PMN的激活剂。IL-8可引起PMN的形变、游走[3], 胞内钙离子浓度升高,呼吸爆发[4],以及一级、二级颗粒的胞外分泌[5] 。此外,IL-8还能促进PMN向内皮细胞粘附和迁移[6],上调人PMN表面补体受体1和 3(CR1和CR3)[7]。IL-8的所有这些活性都表明IL-8是一种重要的炎症性细胞因子 。
  既往有学者检测牙周炎患者龈沟液(GCF)中IL-8的含量,结果表明牙周病患牙GCF中的IL-8 含量明显高于牙周健康牙[8,9],也有学者用细菌内毒素(LPS)刺激培养的人牙髓 细胞,发现有IL-8 mRNA和蛋白的表达[10,11], 提示IL-8可能参与牙髓炎症 的发 生,但迄今为止尚缺乏临床资料的证明。IL-8在人牙髓炎时是否有表达,表达水平如何未见 报道。
  本研究采集了临床牙髓炎患牙牙髓渗出液,用ELISA 方法检测了其IL-8含量。

1 材料和方法

1.1 病例选择

  以我院牙体病科门诊和急诊就诊病员中,符合临床诊断标准的急、慢性牙髓炎患牙为研究对 象 ,共56名患者56个牙,其中急性牙髓炎患牙26个,慢性牙髓炎患牙22个,年龄在19~51岁之 间。对照组8人8个牙齿来自临床因阻生需拔除的健康第三磨牙正常牙髓渗出液。要求受试者 无明显全身疾患,无患牙松动,无明显牙髓炎、牙周炎症状,近期未用过抗菌药物及免疫抑 制剂等。

1.2 渗出液的定量

  将甲基纤维素滤纸截成底2mm,边2mm的等腰三角形滤纸条,消毒干燥备用。用微量注射器吸 取与粘性渗出液相似的正常人血清2μl至纸捻尖端缓慢注射浸润,记录纸捻尖端至浸润到达 最远部位的长度,其余纸捻均以此长度作为标准浸润长度,以使得各次取样统一为2μl。

1.3 牙髓渗出液的取样

  正常牙及急、慢性牙髓炎患牙干燥隔湿后,麻醉下于近髓处用6#电机球钻快速穿髓,随 即将准备好的纸捻尖端放在穿髓处,待渗出液到达所需量后取出,按标准浸润长度将尖端浸 润部分剪入含100μl 0.01mol/L PBS(pH7.4)的冻存管中,立即置于-20℃中待检。

1.4 渗出液中IL-8的检测

  采用ELISA夹心法进行检测,IL-8酶联免疫检测试剂盒由第四军医大学免疫教研室提供。操 作按 说明书进行,在酶联免疫检测仪(DG-1型,国营华东电子管厂)上测定A值,绘制标准 曲线,并将A值换算成IL-8含量(μg/ml)。

2 结果

  来自对照组的8例正常牙髓渗出液中未检出IL-8,炎症牙髓渗出液中均检出IL-8,含量在0 .33~0.10μg/L之间,其中急性牙髓炎组高于慢性牙髓炎症组(P<0.01)。

表1 牙髓组织渗出液中IL-8含量   (μg/L)

 正常对照组牙髓炎组
急性慢性
n82622
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编辑: 姚红祥

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