大鼠磨牙及牙周组织中神经纤维分布:神经丝蛋白免疫组织化学研究

2007-5-31 11:05  来源:牙体牙髓牙周病学杂志
作者:樊成涛 阅读量:2154

  【摘 要】  目的:观察大鼠磨牙及牙周组织神 经纤维分布 特点。方法:大鼠磨牙及其牙槽骨脱钙后切片并行神经丝蛋白(NFP)免疫 组织化学染色。结果:大鼠磨牙、牙周膜及牙龈中神经纤维丰富,神经 丝蛋白阳性神经纤维在髓角处形成牙本质细胞下丛,其中一些神经纤维进 入牙本质。在牙周膜,神经丝蛋白阳性神经纤维在牙根下段密集分布。在牙周膜内存在两型 神经末梢:游离神经末梢及Ruffini终末。前者在整个牙周膜内皆有分布,后者常成组地局 限分布在牙根下1/3。在游离龈中神经丝蛋白阳性神经呈丛状分布,在靠近结合上皮处分布 更为密集。结论:神经丝蛋白阳性神经纤维在牙齿及其支持组织的不同部位形态和数量不同,具有特征性分布。
  【关键词】 牙齿;牙髓;牙周;神经丝蛋白;免疫组织化学;大鼠

  牙体组织有丰富的神经分布,牙髓神经主要是痛感受器,而牙 周神 经除了感受痛觉以外,还对触压觉有反应。牙齿及牙周组织神经的分布特征一直是口腔研究 工作者感兴趣的课题, 它对弄清牙齿的痛觉感受、口腔反射等具有重要作用,但是由于神经染色技术的不完 善,目前对牙齿及牙周组织神经的分布还缺乏详细的介绍,在某些方面仍然存在争议[ 1]。
  由于抗神经丝蛋白(neurofliament protein,NFP)免疫组化染色方法观察神经结构比其它形 态学方法清晰,并且其免疫活性不因组织脱钙而降低[2],所以本实验采用抗NFP 免疫组织化学染色方法,观察大鼠磨牙及牙周组织神经纤维的分布。

1 材料和方法

1.1 实验动物

  健康雌性SD大鼠16只,体重(200±10)g。

1.2 实验仪器

  冰冻切片机,Olympus 双目显微镜及其显微照像系统。

1.3 样本固定及免疫组织化学染色

  实验大鼠用速眠新(0.8ml/kg)肌肉注射后深度麻醉,40g/L多聚甲醛心脏灌注固定后,立即 取上颌骨浸入上述固定液内固定24h,4mol/L甲酸和0.5mol/L甲酸钠溶液脱钙5d,去除多 余组织块保留磨牙及牙周组织,入300g/L蔗糖缓冲液过夜,按近远中向做冰冻切片,厚40 μm,常规ABC法免疫组织化学染色。用正常羊血清替代一抗,进行完全相同的免疫组织 化学染色,苏木精衬染胞核。

2 结果

2.1 抗体替代对照实验均为阴性

2.2 牙髓及牙本质神经支配

  来源于上齿槽神经分支的粗大的NFP免疫反应阳性(NFP-IR)神经束从根尖孔进入牙髓,也有 部分神经从侧支根管进入。神经纤维束在根髓中部穿过并发出少量细小的树状分支(图1), 到达冠髓后在多细胞层下方成扇形分开,分支成小束,最后在髓角处形成Raschkow丛,其中 ,一些神经纤维穿过牙本质细胞层垂直进入前期牙本质及钙化牙本质,也有少数的神经纤维 沿牙髓-牙本质界走行一段后进入牙本质,也有一些神经纤维在前期牙本质中折返(图2 )。

2.3 牙周膜神经支配

  牙周膜NFP-IR神经数量少于牙髓,且根尖1/3处较多,较粗的神经纤维位于牙周膜中部稍偏 向牙槽骨侧,并向牙骨质方向发出较细的分支,常伴血管分布(图3)。其来源为根尖神经的 分支,也有一部分穿过牙槽骨壁的孔洞进入牙周膜。

图1 成束的NFP-IR神经纤维走行于根髓中部,并发出树状分支支配根髓 ×20

图2 大鼠磨牙牙髓腔,示Raschkow丛,一些神经纤维进入牙本质 ×40

图3 大鼠磨牙远中牙周膜,示一些较粗的神经纤维发出分支朝向牙骨质 ×40

图4 大鼠磨牙根尖部,示Ruffini小体与游离神经末梢共存 ×40

图5 大鼠磨牙根分叉,示NFP-IR神经束自髓室底的小孔进入并支配牙髓 ×20

图6 大鼠游离龈,示NFR-IR在靠近结合上皮处密集排列,一些神经纤维进入结合上皮层  ×20

  在牙周膜里可观察到两种神经终末:一种为较细的游离神经末梢,多数 纵向走行于牙周膜内 ,少数弯曲走行,呈串珠或条索状,在牙周膜的各个部位皆可看到;另外一种分布在牙周膜 下1/3处,尤其根尖附近,与游离神经末梢常共存,常成组分布,形态不规则,终末突触小 结呈树状、把手状或钟状分支,终末部膨大,边缘可见明显的皱褶,似桑椹状,在牙髓内未 见此种神经末梢存在(图4)。

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编辑: 姚红祥

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