提 要 本文报道了18例口腔颌面部固定性药疹（FDE）病例，并应用4种鼠抗入白细胞抗原的单克隆抗体（McAb），采用标记的链霉亲合素生物素技术（LSAB）对其中10例患者急性期皮损内浸润的T细胞及其亚群、B细胞进行标记。发现病损区内真皮中上部血管周围浸润的细胞中70％～80％为T细胞，其中CD4＋细胞和CD8＋细胞数量大致相同，细胞外移以CD8＋细胞为主，此外还有约15％B细胞。提示CD4＋／CD8＋细胞在介导固定性药疹的炎症反应中起主要作用。
关键词 口腔颌面 固定性药疹 免疫酶技术 LSAB法
材料和方法
一般资料
本组FDE患者18例，其中男10例，女8例，年龄20～55岁，初发者3例，复发者15例，主要致敏药物Co-SMZ、去痛片、感冒清。单纯发生于口腔颌面部者6例，余伴有外生殖器、躯干、四肢病损。病损初见为红斑，以后逐渐肿胀，其上可出现水疱。水疱可自行吸收；如水疱破裂，可出现糜烂、溃疡、愈合后有色素沉着。部分患者病损表面形成痂皮，以后痂皮逐渐脱落、愈合。患者自觉局部烧灼感、麻木感、肿胀感。溃烂者局部疼痛。
标本来源
在局麻下对10例自愿者用6mm环钻、取活体组织，每份标本分成二块，一块用OCT复合物包埋，立即放入液氮中再移至-70℃处保存，另一块用10％福尔马林固定，常规石蜡切片、HE染色，作常规组织病理学诊断，正常皮肤对照5块。
试剂
四种鼠抗人白细胞抗原的McAb，其中全T、CD4，全B为Vector公司生产，CD8由北京医科大学免疫教研室生产，使用浓度分别为1∶100、1∶50、1∶50、1∶10。
方法
①冰冻切片经0.1％戊二醛PBS液固定2分钟，吹风机冷风吹干；②滴加1％小牛血清，室温孵育20分钟；③倾去多余的小牛血清，分别滴加上述4种McAb，室温1小时；④滴加生物素标记的马抗鼠抗血清（1∶200），室温30分钟；⑤滴加辣根过氧化物标记的链霉亲合素（1∶300），室温30分钟；⑥显色液（0.01M pH7.4PBS液50ml,DAB 25mg,30%H2O215ml）显色约3～7分钟；⑦苏木素复杂，甘油明胶封片，光镜下观察。以上每一步骤之间均用0.01M pH7.4 BPBS洗3次，每次3分钟。实验的同时用PBS代替第一抗体作阴性对照。
结 果
组织病理：
10例标本光镜下所见基本一致。表皮细胞内外水肿，表皮上部单个角化不良细胞，点片状基底细胞液化变性，细胞外移。表皮中常有胞浆嗜酸性、胞核固缩的变性细胞。真皮乳头水肿，可见噬黑素细胞，真皮中上部血管扩张，血管周围有淋巴细胞、组织细胞和中性白细胞等炎性细胞浸润。符合FDE的病理改变。
免疫组织化学
经LSAB技术标记后，切片内阳性细胞呈棕褐色。在真皮中上部血管周围浸润的单个核细胞中70～80％为T细胞，其中CD4＋细胞（图1）和CD8＋（图2），在数量上大致相等。细胞外移以CD8＋细胞占多数。B细胞（图3）约占浸润细胞的15％。
图1、2 在真皮中上血管周围浸润的单个核细胞中70～80％为T细胞，其中CD4＋细胞（图1）和CD8＋（图2）在数量上大致相等
图3 B细胞约占浸润细胞的15％
讨 论
FDE属于药物性皮炎，过去称为固定性红斑。有用药史及潜伏期，初次用药多在5～20天内发病。重复用药常在24小时内发生。好发于皮肤粘膜交界处，皮损为红至暗红色斑，圆或椭圆形，发炎剧烈可起大疱；愈合后留紫黑色斑。再次服药，原处复发，并可增多和扩大〔2〕。
免疫组织化学结果显示FDE患者急性期病患处真皮中上层血管周围有T细胞浸润，占所浸润的单个核细胞的70～80％。其中CD4＋细胞和CD8＋细胞在数量上大致相等。CD8＋细胞的数量明显多于其它炎性皮肤病变〔3～5〕。在细胞外移中，主要也是CD8＋细胞。表明CD8＋细胞在FDE急性期可能起重要作用。同时，患者外周血中T淋巴细胞总数也明显增高，CD4＋、CD8＋细胞、IgG和IgM也较正常人升高〔6〕。Theodorids〔7〕报道，在激发FDE后48小时血中IgG、IgA上升，并在病损消退3周才恢复正常，说明在此期间机体免疫功能增强。
