BT2245生化分析仪测定唾液中钙磷氯

　　自1993年开始，我院检验科配合涎腺疾病中心，采用意大利产BT2245 ARCO自动生化分析仪，摸索建立了唾液钙磷氯等无机离子的检测方法。
　　一、材料和方法
　　由涎腺疾病中心门诊医师采集患者唾液，嘱患者经空腹下咀嚼医用白蜡5克，6分钟后收集唾液。将唾液标本收集于塑料试管中，密封保存于-20℃冰箱批量测定。测定前，将标本置室温融化，充分混匀，置离心机3000转/分，10分钟，取标本上清液上机测试。生化试剂盒采用北京化工厂产无机磷测定试剂盒(单一试剂法)，华台生化技术公司产钙测定试剂盒(甲基麝香草酚兰法)，氯测定试剂盒(硫氰酸汞法)；标准液采用北京中生生物工程高技术公司产钙磷氯标准液。仪器采用意大利产BT2245 ARCO全自动任选性生化分析仪。测定方法：唾液钙磷氯的测定采用终点法，测试波长为630nm、492nm，测试温度为37℃。钙测定中，样品与试剂之比为1：25，试剂孵育时间为60秒。磷测定中，样品与试剂之比为1：50，试剂孵育时间为600秒。氯测定中，样品与试剂之比为1：25，试剂孵育时间为200秒。按仪器操作规程，将测定参数输入仪器内存，将唾液标本、标准液排序号后，上机正式测定。
　　二、结果
　　1.精密度：20份患者唾液混合后，进行钙磷氯批内批间测定。①批内测定：钙平行测定23次，X=0.68±0.07mmol/L，批内CV=10.3%。磷平行测定24次，X=4.13±0.25mmol/L，批内CV=6.1%。氯平行测定20次，X=44.62±0.69mmol/L，批内CV=1.55%。②批间测定：共测5天，钙测定39次，X=0.70±0.11mmol/L，批间CV=15.7%。磷测定40次，X=3.94±0.36mmol/L，批间CV=9.1%。氯测定40次，X=49.38±5.26mmol/L，批间CV=10.64%。
　　2.线性范围：①用0.5～2.5mmol/L钙标准液上机实验，表明钙在0.5～2.5mmol/L范围内线性良好。回归方程为Y=0.023X-0.014 n=5 r=0.9999。②用0.32～1.29mmol/L磷标准液上机实验，表明磷在0.32～1.29mmol/L范围内线性良好。回归方程为Y=0.0404X-0.0065 n=4 r=0.9990。③用20～100mmol/L氯标准液上机实验，表明氯在20～100mmol/L范围内线性良好。回归方程为Y=0.0103X+0.3482　n=5　r=0.9826。
　　3.回收实验：①钙回收实验：三支试管中分别加入0.9ml唾液标本。第一份标本中加入0.1ml双蒸水，第二、三份标本中分别加入0.1ml 1.25mmol/L、2.5mmol/L钙标准液，使标本内含钙加入量为0.125mmol/L、0.25mmol/L。将三份标本上机测试，计算回收率。第一份标本测定值为0.9mmol/L，第二、三份标本的测定值分别为1mmol/L、1.12mmol/L，回收率分别为80%、88%，平均回收率84%。②磷回收实验：唾液标本制备同钙回收试验。第二、三份标本中分别加入0.1ml 0.64mmol/L、1.29mmol/L磷标准液，使标本内含磷加入量为0.064mmol/L、0.13mmol/L。将3份标本上机测试，计算回收率。第一份标本测定值为2.72mmol/L，第二、三份标本测定值分别为2.77mmol/L、2.84mmol/L，回收率分别为78%、92.3%，平均回收率85.15%。③氯回收试验：三支试管中分别加入0.4ml唾液标本。第一份标本中加入双蒸水0.02ml，第二、三份标本中分别加入0.02ml 20mmol/L、100mmol/L氯标准液，使标本内含氯加入量为1mmol/L、5mmol/L，将三份标本上机测试，计算回收率。第一份标本测定值为49.86mmol/L，第二、三份标本的测定值分别为50.99mmol/L、55.77mmol/L，回收率分别为113%、118%，平均回收率115%。④正常参考值：选择无全身系统疾病、无口腔内慢性炎症、无涎腺疾病史、涎腺检查未见异常者，共计52人，男女例数相等，年龄18～68岁。采取这些健康成人的唾液标本，随机与患者标本测试钙磷氯含量。测得钙含量范围0.62～2.36mmol/L，X=1.05±0.31mmol/L。测得磷含量范围1.97-4.32mmol/L，X=3.22±0.72mmol/L。测得氯含量范围29.86-60mmol/L，X=18.82±10.06mmol/L。
　　三、讨论