玉洁纯、硫酸锌对口腔主要致龋菌生长产酸的影响

〔摘要〕　目的：评价玉洁纯、硫酸锌对口腔主要致龋菌的影响，确定抑制细 菌所需的浓度 。方法：使用紫外分光光度计及pH电极检测不同浓度的药物及两者相对配伍使用时对口腔主 要致龋菌-变形链球菌和远缘链球菌的抑制效果。结果：玉洁纯、 硫酸锌均能有效地抑制变 链和远链的生长和产酸，硫酸锌不能增强玉洁纯的抑制效果。结论：初步认为玉洁纯可作为龋病预防用药，硫酸锌在配方中的作用有待进一步探讨。
关键词　龋齿；三氯生；硫酸锌；变形链球菌；远缘链球菌

　　玉洁纯(triclosan)，化学名三氯羟苯醚(2’，4，4’-tricloro-2\'hydroxydiphenyl ether)，1968年Furia等发现玉洁纯具有广谱的抗菌作用。由于玉洁纯低毒性、低刺激性的 特点，自80年代末90年代初被考虑用于口腔疾病的治疗。玉洁纯能有效地抑制菌斑的形成， 并有抗炎、减少牙石沉积的多重作用，因此它较多地被考虑用于牙龈炎、牙周炎的防治 〔1〕。作为温和的非离子型抗菌剂，玉洁纯对致龋菌也应具有效的抑制作用，但有关这 方面的报道较为少见。
　　本研究采用体外细菌学实验方法观察不同浓度的玉洁纯和常与之配伍使用的硫酸锌对口腔主 要致龋菌变形链球菌、远缘链球菌生长和产酸的抑制效果，确定抑制所需的浓度，为研制新 型的防龋制剂提供理论依据。

1　材料与方法

1.1　制剂准备
　　玉洁纯：〔汽巴精化(中国)有限公司提供〕，因玉洁纯难溶于水，因此先将 其溶于丙二醇中，再用蒸馏水对半稀释加入培养基。硫酸锌：ZnSO4。7H2O(上海化学试 剂总厂提供)，溶于蒸馏水对半稀释加入培养基。
1.2　细菌培养
　　选用国际参考菌株变形链球菌(Steptococcus mutans Ingbritt,S.m Ing)、远缘链球 菌(Streptococcus sobrinus 6715,S.m 6715)和变形链球菌、远缘链球菌的临床分离菌 株各4株。临床 分离菌株已经涂片镜检、生化鉴定、葡聚糖凝聚实验及DNA G+C定量测定鉴定为变形链球菌 及远缘链球菌。冷冻保存的菌株活化后转种胰蛋白酶消化大豆培养基，微需氧，φ(N2)= 90%，φ(CO2)=5%，37 ℃培养18 h。
1.3　生长抑制实验
　　实验药品：①玉洁纯原液质量浓度自0.005 g/L连续对半稀释5次至0.00016 g/L；②硫酸锌 原液质量浓度自2.5 g/L 连续对半稀释5次至0.08 g/L；③配伍药液：玉洁纯与硫酸锌 质量浓度由低到高相对配伍。
　　保存的细菌经活化后，取培养物于无菌离心管2500 r/min离心，用生理盐水洗涤两次制成悬 液，置紫外分光光度计调整菌浓度为吸光度值等于1(λ=450 nm)。
　　抑制组：用无菌微量加样器吸取不同浓度的药液各0.1 ml，分别加入灭菌的4 ml蛋白胨酵母 葡 萄糖培养基中，加样顺序由低浓度到高浓度；药液加毕后再在每试管中加入0.4 ml菌液，振 荡混匀，微需氧φ(N2)=90%、φ(CO2)=5%、37 ℃培养48 h后取出。培养物经旋涡混合 器混匀，通过紫外分光光度计测定吸光度值，并计算生长抑制率：

　　阳性对照组：培养基中不加药液只加菌液。阴性对照：培养基中只加药液不加菌液。
1.4　产酸抑制实验
　　在测定了各培养基细菌的生长抑制情况后，原培养基用酸度计(pH-3C型，上海雷磁仪器厂)测定培养液的pH值。

2　结　果

　　玉洁纯、硫酸锌以及它们的配伍对S.m、S.sob的国际参考菌株和临床分离菌株都有显著 的抑制作用，抑制效果见图1～6。

药物质量浓度序列为：
 

3　讨　论
　　由于龋病是由细菌引起的感染性疾病，因此研究人员考虑在洁牙剂中加入抗菌剂以达到 长 期抑菌的目的。目前常用的洗必太虽然能有效地抑制口腔细菌的生长，但长期使用可引起口 腔 粘膜着色、牙石沉积增多和菌群失调。而玉洁纯应用在口腔中具有以下优点：长期使用含玉 洁纯的洁牙剂不干扰正常口腔菌丛的生态平衡、不引起粘膜着色和牙石沉积增多。另外，玉 洁纯能与现有的洁牙剂配方相容，并在中性pH条件下保持稳定的疏水性结构，且易于被口腔 粘膜吸收。